“端穩(wěn)中國(guó)碗,裝滿中國(guó)糧”,為了培育好中國(guó)種,科研人員在基因工程育種領(lǐng)域開展了大量的研究。有研究發(fā)現(xiàn)花生細(xì)胞中的S基因在抗真菌類病害中發(fā)揮著重要作用??蒲腥藛T提取花生細(xì)胞中S基因的mRNA,通過基因重組技術(shù),以Ti質(zhì)粒為表達(dá)載體,導(dǎo)入水稻葉片外植體細(xì)胞中,使水稻獲得了對(duì)稻瘟?。ㄓ烧婢腥疽穑瑢?dǎo)致水稻減產(chǎn))的抗性。據(jù)圖示信息回答下列問題:
(1)科學(xué)家提取花生細(xì)胞的mRNA后通過
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
過程獲得其cDNA,經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增S基因。通過該方法獲得的S基因與花生細(xì)胞中的S基因的DNA序列是否完全一致?不完全一致
不完全一致
(填“完全一致”或“不完全一致”),原因是 以花生細(xì)胞的mRNA通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的cDNA不含內(nèi)含子、啟動(dòng)子和終止子等非編碼序列
以花生細(xì)胞的mRNA通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的cDNA不含內(nèi)含子、啟動(dòng)子和終止子等非編碼序列
。
(2)用PCR技術(shù)擴(kuò)增S基因時(shí),需要設(shè)計(jì)引物,引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
。為了使目的基因能夠被限制酶切割,需要在引物的 5'端
5'端
(填“3'端”或“5'端”)添加限制酶識(shí)別序列。
(3)為了成功構(gòu)建重組表達(dá)載體,確保目的基因插入載體中方向正確,最好選用 XbaⅠ、HindⅢ
XbaⅠ、HindⅢ
(填圖中限制酶)酶切割S基因的cDNA和載體。用農(nóng)桿菌侵染水稻葉片外植體,其目的是 通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞
通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞
。
(4)轉(zhuǎn)基因水稻是否表現(xiàn)出了抗性,需要進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè),檢測(cè)的方法是 對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻植株接種相應(yīng)的真菌,觀察其是否患稻瘟病
對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻植株接種相應(yīng)的真菌,觀察其是否患稻瘟病
。