塑料中含有的雙酚A（BPA）可在生物體內(nèi)富集，導(dǎo)致生物體內(nèi)分泌系統(tǒng)失衡和紊亂。漆酶是一類(lèi)藍(lán)色胞外含銅多酚氧化酶，能使愈創(chuàng)木酚氧化產(chǎn)生紅褐色物質(zhì)，能有效降解BPA，廣泛分布于白腐真菌中?？蒲腥藛T欲從土壤中篩選和分離出高產(chǎn)漆酶的菌株，構(gòu)建高效的BPA處理方法，實(shí)驗(yàn)思路。
（1）培養(yǎng)基的配制：
PDA培養(yǎng)基：土豆20%+葡萄糖20%+瓊脂2%+水：
G-PDA培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基+0.04%愈創(chuàng)木酚+100μg/mL氨芐青霉素；
（2）菌種的分離：
采集林下土樣加入 無(wú)菌水無(wú)菌水制成土壤懸液，利用 涂布分離涂布分離法接種于G-PDA培養(yǎng)基平板上，將其 倒置倒置于30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每隔24h觀察 變色圈大小、顏色深淺、顯色時(shí)間變色圈大小、顏色深淺、顯色時(shí)間等指標(biāo)來(lái)衡量產(chǎn)漆酶的能力。
（3）粗酶液的制備：
將分離出的菌株接種于液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，30℃恒溫振蕩培養(yǎng)7d,培養(yǎng)液經(jīng)離心后取 上清液上清液作為粗酶液。漆酶的產(chǎn)量受發(fā)酵液初始pH、培養(yǎng)溫度 碳源的種類(lèi)和濃度、氮源的種類(lèi)和濃度、Cu2+濃度、培養(yǎng)時(shí)間碳源的種類(lèi)和濃度、氮源的種類(lèi)和濃度、Cu2+濃度、培養(yǎng)時(shí)間 （至少兩點(diǎn)）因素的影響。
（4）酶的應(yīng)用：
游離的漆酶的催化活性易受環(huán)境因素等影響，且難 重復(fù)使用重復(fù)使用，利 固定化酶固定化酶技術(shù)，可顯著增強(qiáng)漆酶的利用率和對(duì)廢水中BPA的去除效益。
（二）自然界中只有極少數(shù)原核微生物能固氮，而大多數(shù)農(nóng)作物不具備固氮能力，近些年來(lái)人們嘗試通過(guò)植物細(xì)胞工程的兩條途徑來(lái)培養(yǎng)固氮植株。
（1）途徑一：
①獲得目的基因：若固氮基因片段是已知的，可用 PCR （擴(kuò)增）PCR （擴(kuò)增）或 化學(xué)合成化學(xué)合成方法獲得。
②形成重組DNA分子并導(dǎo)入受體細(xì)胞：將固氮基因與載體DNA連接在-起，常選用 Ti質(zhì)粒Ti質(zhì)粒作為該基因的載體使用，之后把形成的重組DNA分子導(dǎo)入植物細(xì)胞：
③篩選與表達(dá)：若受體細(xì)胞轉(zhuǎn)入 無(wú)氮（源）無(wú)氮（源）培養(yǎng)基中仍能繼續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育，說(shuō)明固氮基因已在受體細(xì)胞中表達(dá)；
④植物組織培養(yǎng)：分離上述成功表達(dá)固氮基因的單個(gè)植物細(xì)胞，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)基中成分誘導(dǎo)，可發(fā)生類(lèi)似受精卵經(jīng)過(guò)卵裂、分化、器官發(fā)生器官發(fā)生和形態(tài)建成而發(fā)育成胚的過(guò)程，之后培養(yǎng)獲得具有固氮能力試管苗.
（2）途徑二：將植物細(xì)胞 纖維素酶和果膠纖維素酶和果膠酶處理得到的原生質(zhì)體與去壁后的固氮菌進(jìn)行 細(xì)胞融合細(xì)胞融合，再通過(guò)培養(yǎng)獲得具有固氮能力的試管苗。
（3）上述兩條途徑獲得的試管苗數(shù)量不夠，需在初代培養(yǎng)后連續(xù)數(shù)代擴(kuò)大繁殖，繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)過(guò)程。
【答案】無(wú)菌水；涂布分離；倒置；變色圈大小、顏色深淺、顯色時(shí)間；上清液；碳源的種類(lèi)和濃度、氮源的種類(lèi)和濃度、Cu2+濃度、培養(yǎng)時(shí)間；重復(fù)使用；固定化酶；PCR （擴(kuò)增）；化學(xué)合成；Ti質(zhì)粒；無(wú)氮（源）；器官發(fā)生；纖維素酶和果膠；細(xì)胞融合；繼代培養(yǎng)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：1難度：0.7
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1．（一）地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)70億噸，其中40%～60%能被土壤中某些微生物分解利用，這是因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶將纖維素分解成葡萄糖從而為人類(lèi)所利用。某科研團(tuán)隊(duì)想從富含纖維素的土壤中篩選可分解纖維素的菌株，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，其組分中葡萄糖苷酶的作用是。
（2）從富含纖維素的土壤中篩選目標(biāo)菌株的方法是染色法。實(shí)驗(yàn)流程是→選擇培養(yǎng)→→涂布平板→挑選菌落。
（二）“爆爆蛋”又叫海藻魔豆，口感Q彈爽滑，輕咬外皮“噗吡”流出香甜的果汁，深受消費(fèi)者喜愛(ài)?！氨啊蹦壳白鳛槭称诽砑觿V泛應(yīng)用于果汁、奶茶、冷飲、雪糕、沙拉、甜品等食品加工中。如圖是“爆爆蛋”制作流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（3）果膠酶能將果膠分解為可溶性的，使得制備的果汁比鮮榨果汁更澄清。用果膠酶處理果泥時(shí)需要不斷地?cái)嚢璺磻?yīng)混合物，目的是。
（4）果汁顆粒固定化，就是將第三步的混合液逐滴地加入到CaCl2溶液中，其作用是。
（5）若制備的“爆爆蛋”口感偏硬，咬不動(dòng)，可能的原因是。發(fā)布：2024/12/19 20:30:1組卷：8引用：1難度：0.7 -
2．啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中，大麥經(jīng)發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒等工序后，最終過(guò)濾、調(diào)節(jié)、分裝。下列說(shuō)法不正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/18 1:30:1組卷：12引用：3難度：0.7 -
3．腐乳是我國(guó)古代勞動(dòng)人民制造出的一種經(jīng)過(guò)微生物發(fā)酵的大豆食品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 18:30:1組卷：6引用：3難度：0.7
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