2019年末,一場突如其來的新冠肺炎疫情打亂了人們正常的生活節(jié)奏。2020年1月6日,中國疾控中心分離出第一株新冠病毒;1月7日完成對該病毒的全部基因組測序;1月24日首個針對新冠病毒的核酸檢測試劑盒通過審核,為新冠肺炎的診斷提供了有力的保障。新冠病毒是一種單股正鏈RNA病毒,外面包裹著衣殼蛋白和囊膜,囊膜上存在刺突蛋白,能特異性識別細胞膜上的ACE2受體從而感染細胞。新冠病毒進入細胞后,首先以正鏈RNA為模板翻譯出RNA聚合酶,然后在該酶的作用下合成負鏈RNA,再以負鏈RNA為模板合成大量的正鏈RNA或結構蛋白mRNA。
(1)核酸檢測多數(shù)采用實時熒光RT-PCR法。由于新冠病毒的遺傳物質(zhì)為RNA,在進行PCR之前,應該將樣本中的病毒RNA提取出來,在逆(反)轉錄逆(反)轉錄酶的作用下合成互補的DNA單鏈(該過程稱為RT)。PCR過程需要加入引物,原因是DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從3′端延伸DNA鏈DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從3′端延伸DNA鏈。2020年1月24日,中國疾控中心公布了針對新冠病毒核酸不同序列設計的引物,其中針對衣殼蛋白基因的一段引物Ⅰ為GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT,能否依據(jù)此序列設計出另一段引物Ⅱ的序列?不能不能,理由是兩段引物的堿基序列沒有相關性(既不相同,也不互補;或其他合理答案)兩段引物的堿基序列沒有相關性(既不相同,也不互補;或其他合理答案)。與傳統(tǒng)PCR相比,熒光RT-PCR過程中加入了熒光探針,可通過熒光信號對PCR進程實時檢測,PCR產(chǎn)物越多,熒光越強。如果待測樣本中沒有檢測出熒光,初步斷定樣本中不含有不含有(填“含有”或“不含有”)新冠病毒。
(2)由于核酸檢測比較費時費力,現(xiàn)已開發(fā)出多款針對新冠病毒的抗原或抗體檢測試劑盒,可在更短時間內(nèi)得出檢測結果。假如你是一名科研人員,現(xiàn)提供新冠病毒刺突蛋白基因、能產(chǎn)生專一針對新冠病毒抗體的B細胞及其它相關的生物學材料,請運用現(xiàn)代生物技術,設計一款能夠快速大規(guī)模生產(chǎn)、針對新冠病毒抗原或抗體檢測的試劑盒,簡要寫出生產(chǎn)試劑盒的設計思路(只寫出針對抗原或抗體檢測的一種方案即可)。
(3)在對新冠病毒檢測的過程中,偶爾會出現(xiàn)核酸檢測陽性而抗體檢測陰性的現(xiàn)象,假如這兩種試劑盒的質(zhì)量及檢測方法都沒有問題,試從免疫角度分析造成這種現(xiàn)象可能的原因新冠病毒雖感染機體,但機體沒來得及產(chǎn)生相應的抗體(或產(chǎn)生的抗體數(shù)量太少)新冠病毒雖感染機體,但機體沒來得及產(chǎn)生相應的抗體(或產(chǎn)生的抗體數(shù)量太少)。
(4)2020年2月15日,法維拉韋正式獲得國家藥監(jiān)局批準上市,成為我國第一個針對新冠肺炎具有潛在療效的藥物,該藥物能夠專一抑制新冠病毒RNA聚合酶,由于人體細胞內(nèi)也存在RNA聚合酶,有人擔心該藥物的安全性,請分析他的擔心有無道理?沒有道理沒有道理,理由是因為新冠病毒的RNA聚合酶催化以RNA為模板的生理過程,而人體細胞內(nèi)的RNA聚合酶催化以DNA為模板的生理過程,二者不是同一種酶,因此法維拉韋不會抑制人體細胞內(nèi)RNA聚合酶的活性。因為新冠病毒的RNA聚合酶催化以RNA為模板的生理過程,而人體細胞內(nèi)的RNA聚合酶催化以DNA為模板的生理過程,二者不是同一種酶,因此法維拉韋不會抑制人體細胞內(nèi)RNA聚合酶的活性。。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定;目的基因的篩選與獲取.
【答案】逆(反)轉錄;DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從3′端延伸DNA鏈;不能;兩段引物的堿基序列沒有相關性(既不相同,也不互補;或其他合理答案);不含有;新冠病毒雖感染機體,但機體沒來得及產(chǎn)生相應的抗體(或產(chǎn)生的抗體數(shù)量太少);沒有道理;因為新冠病毒的RNA聚合酶催化以RNA為模板的生理過程,而人體細胞內(nèi)的RNA聚合酶催化以DNA為模板的生理過程,二者不是同一種酶,因此法維拉韋不會抑制人體細胞內(nèi)RNA聚合酶的活性。
【解答】
【點評】
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