某研究團隊從沙漠野生檉柳中克隆出了一個耐鹽堿基因TcSR1。該團隊用限制酶BalⅡ切割目的基因TcSR1，用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒載體V3，兩種限制酶的識別序列及酶切位點如圖所示，經(jīng)過體外重組和轉(zhuǎn)化，最終獲得了能夠在鹽堿地生長的楊樹新品種。回答下列問題：
（1）使用限制酶BalⅡ和BamHⅠ切割得到的DNA片段末端均是 黏性黏性末端，用兩種酶分別切割目的基因和質(zhì)粒載體V3后，再用 DNA連接DNA連接酶處理，以構(gòu)建基因表達載體，質(zhì)粒載體V3一般應(yīng)具有 標記基因標記基因以供重組DNA的篩選。
（2）將目的基因?qū)霔顦浼毎?，最常采用的方法?農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。若要檢測楊樹植株中目的基因TcSR1是否發(fā)生轉(zhuǎn)錄，可采用 分子雜交分子雜交技術(shù)，需要將 放射性同位素標記的基因TcSR1放射性同位素標記的基因TcSR1片段制成探針，通過檢測放射性達到目的。
（3）植物組織培養(yǎng)技術(shù)與基因工程技術(shù)相結(jié)合可獲得轉(zhuǎn)基因植株，將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是 轉(zhuǎn)基因細胞脫分化愈傷組織再分化完整植物轉(zhuǎn)基因細胞脫分化愈傷組織再分化完整植物（用流程圖表示）。
脫分化
再分化
脫分化
再分化
【考點】基因工程的操作過程綜合；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】黏性；DNA連接；標記基因；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；分子雜交；放射性同位素標記的基因TcSR1；轉(zhuǎn)基因細胞愈傷組織完整植物
脫分化
再分化
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：8引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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