如圖表示克隆短尾猴的流程。我國(guó)科學(xué)家通過(guò)調(diào)控組蛋白的甲基化和乙?;揎?,調(diào)節(jié)重構(gòu)胚相關(guān)基因的表達(dá),解決了體細(xì)胞克隆猴胚胎的發(fā)育率和妊娠率低這一技術(shù)難點(diǎn)?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)采集的卵母細(xì)胞要在體外培養(yǎng)到
減數(shù)分裂Ⅱ中期
減數(shù)分裂Ⅱ中期
;普遍使用 顯微操作
顯微操作
法去核。
(2)除病毒誘導(dǎo)外,還可以采用 電融合
電融合
法誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞融合。
(3)圖中的化學(xué)方法包括用曲古抑菌素A處理和注入Kdm4d的mRNA,結(jié)果極大地提高了胚胎的發(fā)育率和妊娠率。已知曲古抑菌素A是組蛋白去乙酰化酶抑制劑,Kdm4d是去甲基化酶,能去除組蛋白甲基化位點(diǎn)H3K9me3中的甲基。據(jù)此分析,圖中的化學(xué)方法能提高胚胎發(fā)育率和妊娠率的機(jī)制分別是 曲古抑菌素A通過(guò)提高組蛋白的乙?;剑{(diào)節(jié)重構(gòu)胚相關(guān)基因的表達(dá),Kdm4d的mRNA表達(dá)Kdm4d,降低組蛋白的甲基化水平,調(diào)節(jié)重構(gòu)胚相關(guān)基因的表達(dá),進(jìn)而提高胚胎發(fā)育率和妊娠率
曲古抑菌素A通過(guò)提高組蛋白的乙?;剑{(diào)節(jié)重構(gòu)胚相關(guān)基因的表達(dá),Kdm4d的mRNA表達(dá)Kdm4d,降低組蛋白的甲基化水平,調(diào)節(jié)重構(gòu)胚相關(guān)基因的表達(dá),進(jìn)而提高胚胎發(fā)育率和妊娠率
。
(4)胚胎移植前,需要對(duì)代孕母猴進(jìn)行 同期發(fā)情
同期發(fā)情
處理,為即將移入的胚胎提供合適的生理環(huán)境??寺『锏某晒ε嘤?,說(shuō)明重構(gòu)胚具有 發(fā)育成完整個(gè)體
發(fā)育成完整個(gè)體
的能力;克隆小猴的性別與圖中 胎兒猴
胎兒猴
的相同。