胰島素作為治療糖尿病的特效藥，市場潛力巨大，科學(xué)家利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得轉(zhuǎn)入胰島素基因的大腸桿菌，通過發(fā)酵工程，實現(xiàn)胰島素的大量生產(chǎn)。圖1表示胰島素基因及其上的限制酶酶切位點，圖2表示所用質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)?；卮鹨韵聠栴}。
（1）已知DNA復(fù)制時，子鏈延伸的方向是從5′→3′，即沿著模板鏈的3′→5′。若要擴(kuò)增出胰島素基因并用于表達(dá)載體的構(gòu)建，應(yīng)選擇的引物是 引物1和引物8引物1和引物8，選擇這兩種引物的原因是 既能保證正常合成子鏈，又包含限制酶切割位點既能保證正常合成子鏈，又包含限制酶切割位點。若要得到胰島素基因，至少經(jīng)過 33次循環(huán)。
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，最好選擇的限制酶是 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ，原因是 既能防止質(zhì)粒自身環(huán)化，又可以保證目的基因正確連接在質(zhì)粒上既能防止質(zhì)粒自身環(huán)化，又可以保證目的基因正確連接在質(zhì)粒上。
（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時，需用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌，其目的是 使大腸桿菌變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞，便于從周圍環(huán)境吸收DNA分子使大腸桿菌變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞，便于從周圍環(huán)境吸收DNA分子。
（4）為了將成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來，甲同學(xué)在加入氨芐青霉素的培養(yǎng)基中進(jìn)行接種，結(jié)果如圖3。乙同學(xué)認(rèn)為該結(jié)果得到的菌落并不都是成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，你認(rèn)為乙同學(xué)判斷的理由是 只導(dǎo)入了質(zhì)粒的大腸桿菌也能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上形成菌落只導(dǎo)入了質(zhì)粒的大腸桿菌也能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上形成菌落。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】引物1和引物8；既能保證正常合成子鏈，又包含限制酶切割位點；3；BamHⅠ和HindⅢ；既能防止質(zhì)粒自身環(huán)化，又可以保證目的基因正確連接在質(zhì)粒上；Ca2+；使大腸桿菌變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞，便于從周圍環(huán)境吸收DNA分子；只導(dǎo)入了質(zhì)粒的大腸桿菌也能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上形成菌落
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：36引用：3難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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