原生質(zhì)體制備需要在較高滲透壓的甘露醇溶液中進行。為了探究原生質(zhì)體制備中甘露醇的適宜濃度，某實驗小組設計了以下實驗。請以原生質(zhì)體數(shù)目和體積變化為檢測指標，根據(jù)提供的實驗材料完善實驗思路，預測實驗結果并分析。
材料與用具：某植物單細胞懸液，2mol/L的甘露醇溶液，細胞壁水解酶，蒸餾水，培養(yǎng)瓶，血細胞計數(shù)板，顯微鏡（具有測距功能）等。
（要求與說明：原生質(zhì)體計數(shù)和原生質(zhì)體體積測量的具體操作過程不作要求，不考慮加入單細胞懸液對甘露醇溶液濃度的影響）
（1）實驗思路：
①將2mol/L的甘露醇溶液按濃度梯度稀釋后分為若干組，調(diào)節(jié)溶液

pH

pH

后加入各組培養(yǎng)瓶，再加入細胞壁水解酶。
②向各組培養(yǎng)瓶中加入適量的單細胞懸液。
③一段時間后，

用血細胞計數(shù)板和顯微鏡進行原生質(zhì)體數(shù)目和體積測定

用血細胞計數(shù)板和顯微鏡進行原生質(zhì)體數(shù)目和體積測定

。
④對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
（2）預測實驗結果（設計一個坐標系，用曲線表示預測的實驗結果）：

。
（3）分析與討論
①除了酶解法以外，還可以將愈傷組織通過

液體懸浮培養(yǎng)

液體懸浮培養(yǎng)

法制備成單細胞懸液。
②可用血細胞計數(shù)板對原生質(zhì)體進行計數(shù)，一般計數(shù)總數(shù)不少于300個細胞?，F(xiàn)有一計數(shù)板，計數(shù)區(qū)共25個中格，每個中格有16個小格，采用五點采樣法，計數(shù)的每個小格中應平均不少于

4

4

個原生質(zhì)體（四舍五入取整數(shù)）。
③當甘露醇溶液濃度低于一定值時，原生質(zhì)體的數(shù)目開始減少，原因是

甘露醇溶液濃度小于部分原生質(zhì)體內(nèi)部濃度，部分原生質(zhì)體吸水漲破

甘露醇溶液濃度小于部分原生質(zhì)體內(nèi)部濃度，部分原生質(zhì)體吸水漲破

，所以要使用較高濃度的甘露醇溶液；但是甘露醇溶液濃度也不能太高，因為濃度過高的甘露醇溶液會讓原生質(zhì)體

過度失水

過度失水

，從而降低原生質(zhì)體活性。檢測原生質(zhì)體活性時可用細胞的

呼吸速率

呼吸速率

為指標。