我國科學(xué)家從某種細(xì)菌中提取抗蟲基因，轉(zhuǎn)入煙草并培育成抗蟲煙草。如圖是轉(zhuǎn)基因抗蟲煙草的培育過程，圖中箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向，三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是：Bg/II （A↓GATCT）、EcoRI（G↓AATTC）、HindIII （A↓AGCTT）?；卮鹣铝袉栴}：
（1）Bg/II、EcoRI、HindIII等限 制性核酸內(nèi)切酶主要是從 原核生物原核生物獲得，這些酶并不切割自身DNA分子的原因可能是 自身的基因中不具備這種酶的識(shí)別序列（或識(shí)別序列甲基化）自身的基因中不具備這種酶的識(shí)別序列（或識(shí)別序列甲基化）。
（2 ）培育該轉(zhuǎn)基因抗蟲煙草的核心工作是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建，根據(jù)圖示可知，應(yīng)選用限制酶EcoRI和HindIII處理目的基因，不使用限制酶Bg/II和EcoRI、Bg/II和HindIII切割目的基因原因分別是 可能不能獲得目的基因可能不能獲得目的基因和 目的基因和質(zhì)粒DNA發(fā)生反向連接而不能轉(zhuǎn)錄目的基因和質(zhì)粒DNA發(fā)生反向連接而不能轉(zhuǎn)錄。
（3）將抗蟲基因?qū)朕r(nóng)桿菌時(shí)，應(yīng)將其插入到農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的 T-DNAT-DNA，培養(yǎng)過程①應(yīng)在培養(yǎng)基中添加 卡那霉素卡那霉素。
（4）檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗蟲煙草的染色體DNA上是否插入了抗蟲基因，常用的方法是 DNA雜交技術(shù)、RNA分子雜交技術(shù)DNA雜交技術(shù)、RNA分子雜交技術(shù)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】原核生物；自身的基因中不具備這種酶的識(shí)別序列（或識(shí)別序列甲基化）；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；可能不能獲得目的基因；目的基因和質(zhì)粒DNA發(fā)生反向連接而不能轉(zhuǎn)錄；T-DNA；卡那霉素；DNA雜交技術(shù)、RNA分子雜交技術(shù)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：13引用：1難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ）
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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