土壤中含有多種微生物，某研究小組欲分離能在Fe²⁺污染的土壤環(huán)境下生存的希瓦氏菌；進(jìn)行了相關(guān)研究?；卮鹣铝袉栴}：
（1）配制培養(yǎng)基：加入牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、NaCl、H₂O及

含高濃度Fe²⁺的溶液

含高濃度Fe²⁺的溶液

等并滅菌；該培養(yǎng)基按功能劃分，屬于

選擇

選擇

培養(yǎng)基。
（2）分離希瓦氏菌：將10g土樣溶于90mL蒸餾水中，再稀釋成多個倍數(shù)，取多個稀釋倍數(shù)的土壤樣品液0.1mL分別接種到多個平板上，這樣做的目的是

為了獲得菌落數(shù)量合適的平板，并排除偶然因素造成的誤差

為了獲得菌落數(shù)量合適的平板，并排除偶然因素造成的誤差

；培養(yǎng)一段時間后，A、B研究員在10⁵稀釋倍數(shù)下得到的結(jié)果：A涂布4個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是150、178、259、310；B涂布4個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是152、165、175、184，則每克土壤樣品中的希瓦氏菌數(shù)量最可能為

1.69×10⁸

1.69×10⁸

個。
（3）進(jìn)一步純化希瓦氏菌：采用平板劃線法接種培養(yǎng)一段時間后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域上都不 間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域上幾乎無菌落，分析出現(xiàn)此現(xiàn)象的原因可能是

接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線；未從第一區(qū)域末端開始劃線

接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線；未從第一區(qū)域末端開始劃線

（答出兩點(diǎn)）。
（4）研究人員還欲采用測定ATP含量的方法估算希瓦氏菌數(shù)，該方法的依據(jù)是

活細(xì)胞都能產(chǎn)生ATP，因此可用于估算數(shù)目

活細(xì)胞都能產(chǎn)生ATP，因此可用于估算數(shù)目

，此方法與顯微鏡直接計數(shù)相比，得到的希瓦氏菌數(shù)目

少

少

（填“多”或“少”），原因是

顯微鏡直接計數(shù)統(tǒng)計中包括死細(xì)胞和活細(xì)胞

顯微鏡直接計數(shù)統(tǒng)計中包括死細(xì)胞和活細(xì)胞

。