近年來,雜種優(yōu)勢(shì)的利用使油菜的株高至少增加20cm,株高過高容易倒伏造成減產(chǎn)。研究人員對(duì)甘藍(lán)型油菜中的矮稈突變體ds-3進(jìn)行了系列研究。
(1)很多植物的矮稈類型均與赤霉素(GA)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常有關(guān),研究者用GA處理ds-3,得到結(jié)果如圖1??芍猟s-3對(duì)GA敏感性減弱,理由是
與野生型相比,ds-3幼苗下胚軸經(jīng)GA處理后伸長(zhǎng)不顯著
與野生型相比,ds-3幼苗下胚軸經(jīng)GA處理后伸長(zhǎng)不顯著
。
(2)ds-3與野生型雜交獲得的F1株高介于雙親之間。F1自交獲得的F2群體株高呈現(xiàn)三峰(如圖2),統(tǒng)計(jì)數(shù)量比例符合1:2:1,說明ds-3矮稈表型的遺傳遵循孟德爾基因 分離
分離
定律。預(yù)期F,與野生型親本回交獲得的后代群體株高在 84~172
84~172
cm范圍內(nèi)呈現(xiàn) 雙
雙
峰。
(3)為確定突變基因的位置,研究者根據(jù)油菜染色體上特定的DNA序列(如M/m、N/n)設(shè)計(jì)了多對(duì)引物,提取上述F2群體中極端矮稈植株的DNA進(jìn)行PCR,產(chǎn)物電泳后的部分結(jié)果如圖3。
據(jù)結(jié)果可將突變基因定位在 7
7
號(hào)染色體上,請(qǐng)解釋單株丙擴(kuò)增結(jié)果出現(xiàn)的原因。 突變基因及其等位基因與M/m位于非同源染色體上。減數(shù)分裂過程中非同源染色體自由組合,使F1既能產(chǎn)生含突變基因與M的重組型配子,也能產(chǎn)生含突變基因與m的親本型配子,受精后發(fā)育成丙
突變基因及其等位基因與M/m位于非同源染色體上。減數(shù)分裂過程中非同源染色體自由組合,使F1既能產(chǎn)生含突變基因與M的重組型配子,也能產(chǎn)生含突變基因與m的親本型配子,受精后發(fā)育成丙
。
(4)將野生型與突變體ds-3上述染色體的候選基因R進(jìn)行DNA測(cè)序,結(jié)果如圖4。
由于堿基對(duì)的 替換
替換
使ds-3的R基因發(fā)生突變,導(dǎo)致其編碼的R蛋白結(jié)構(gòu)改變。
擴(kuò)增出野生型和ds-3R基因上長(zhǎng)為353bp的片段,經(jīng)限制酶HindⅢ處理后,ds-3的該片段可被切成312bp和41bp兩段。研究者利用酶切電泳的方法對(duì)F2單株進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果證實(shí)R基因該突變位點(diǎn)與突變表型之間直接相關(guān)。
請(qǐng)?jiān)诖痤}卡上繪出F2單株的電泳結(jié)果。
(5)R蛋白是GA作用途徑中的負(fù)調(diào)控因子,其空間結(jié)構(gòu)包括感知GA信號(hào)的結(jié)構(gòu)域和阻遏GA響應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄的結(jié)構(gòu)域,作用機(jī)理如圖5。
綜合圖中信息和研究結(jié)果,解釋ds-3對(duì)GA不敏感的原因。 R基因突變導(dǎo)致R蛋白結(jié)構(gòu)改變,感知GA信號(hào)的功能喪失,但不影響其阻遏GA響應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄。當(dāng)用GA處理突變體ds-3后,其R蛋白無法響應(yīng)GA信號(hào)從而不降解,繼續(xù)抑制GA響應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致ds-3對(duì)GA不敏感
R基因突變導(dǎo)致R蛋白結(jié)構(gòu)改變,感知GA信號(hào)的功能喪失,但不影響其阻遏GA響應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄。當(dāng)用GA處理突變體ds-3后,其R蛋白無法響應(yīng)GA信號(hào)從而不降解,繼續(xù)抑制GA響應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致ds-3對(duì)GA不敏感
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