組織型纖溶酶原激活劑（tPA）是體內(nèi)纖溶系統(tǒng)的生理性激動劑，也是一種新型的血栓溶解劑。生長激素（GH）可促進動物細胞增殖和乳腺生長發(fā)育及維持泌乳，在動物遺傳育種領(lǐng)域具有重要的功能。研究人員將GH基因?qū)朕D(zhuǎn)tPA基因小鼠體內(nèi)，獲得雙轉(zhuǎn)基因小鼠，以期提高小鼠乳汁中的tPA表達量?；卮鹣铝袉栴}：
（1）首先構(gòu)建GH基因的表達載體，如圖所示：

GH基因上游的CMV能被

RNA聚合酶

RNA聚合酶

識別并結(jié)合，從而開啟轉(zhuǎn)錄過程；若GH基因無內(nèi)含子，則它是通過

逆（反）轉(zhuǎn)錄

逆（反）轉(zhuǎn)錄

（過程）得到的。
（2）對卵細胞供體和受體小鼠進行

同期發(fā)情

同期發(fā)情

處理，之后還要給供體小鼠注射促性腺激素，以促進其超數(shù)排卵，然后與轉(zhuǎn)tPA基因公鼠交配。供體小鼠受精后，獲取受精卵，將GH基因表達載體用

顯微注射

顯微注射

法導(dǎo)入受精卵中。將轉(zhuǎn)基因受精卵轉(zhuǎn)移至受體小鼠體內(nèi)，待仔鼠出生。有時為了獲取大量小鼠胚胎細胞用于藥物篩選，可用

胰蛋白

胰蛋白

酶分散小鼠囊胚的內(nèi)細胞團，取分散細胞作為初始材料進行培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加抑制因子或者在

飼養(yǎng)層

飼養(yǎng)層

細胞上培養(yǎng)，維持不分化的狀態(tài)，以提高小鼠胚胎細胞克隆的成功率。
（3）PCR是一項在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)，它又稱為

多聚酶鏈?zhǔn)?/div>

多聚酶鏈?zhǔn)?/div>反應(yīng)。要對GH基因和tPA基因進行PCR擴增，則需提取細胞基因組DNA，并設(shè)計

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種引物。