當前位置： 2021-2022學年山西省長治市高二（下）期末生物試卷> 試題詳情

某研究小組計劃通過多聚酶鏈式反應（PCR）擴增目的基因并用于構建轉基因工程菌，其擴增過程示意圖如下?；卮鹣铝袉栴}：
（1）圖中“？”代表的溫度約為
50
50
℃。步驟1的目的是
使模板DNA的雙鏈解聚
使模板DNA的雙鏈解聚
。
（2）PCR過程中需要使用的酶是
耐高溫的DNA聚合酶
耐高溫的DNA聚合酶
，和人體內同種功能的酶相比，該酶的顯著特點是
可以在高溫條件下正常發(fā)揮酶的催化作用
可以在高溫條件下正常發(fā)揮酶的催化作用
。
（3）設計一對與MT基因兩端序列互補配對的引物（引物1和引物2），設計引物時需要避免引物之間形成
氫鍵
氫鍵
，而造成引物自連。若將一個目的基因通過PCR過程共進行5輪循環(huán)，則有
31
31
條DNA單鏈含引物1（或引物2）。
（4）PCR擴增時，復性溫度的設定是成敗的關鍵。復性溫度過高會破壞
引物與模板
引物與模板
的堿基配對。復性溫度的設定與引物長度、堿基組成有關，長度相同但
G、C
G、C
堿基含量高的引物需要設定相對更高的復性溫度。

【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．

【答案】50；使模板DNA的雙鏈解聚；耐高溫的DNA聚合酶；可以在高溫條件下正常發(fā)揮酶的催化作用；氫鍵；31；引物與模板；G、C

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：2引用：3難度：0.6

相似題

1．PCR是利用體內DNA復制的原理，進行生物體外復制特定 DNA片段的核酸合成技術。請回答有關問題：
（1）PCR反應的基本步驟是變性、

、

。
（2）科學家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化

方向的聚合反應。圖1表示細胞內染色體 DNA的半保留復制過程，有一條子鏈是先合成短的DNA片段（稱為岡崎片段），再形成較長的分子，可推測參與以上過程的酶有DNA聚合酶、

、

。在PCR過程中無岡崎片段形成，原因是細胞內染色體 DNA的復制過程特點是

，PCR過程的特點是

。
（3）雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結構如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段，通過PCR技術獲得以堿基“C”為末端（3'為堿基C）不同長度的子鏈DNA片段，將以上子鏈 DNA片段進行電泳分離可得到

種不同長度的子鏈 DNA片段。為使實驗順利進行，在PCR反應管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應的緩沖液等物質外，還需要加入下列哪組原料

。
A.dGTP，dATP，dTTP
B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C.dGTP，dATP，dTTP，dCTP
D.ddGTP，ddATP，ddTTP，ddCTP
（4）如圖3為形成單鏈DNA后，再進行PCR擴增示意圖。

催化①過程的酶是

；核酸酶H的作用是

。如果某RNA單鏈中一共有80個堿基，其中C有15個，A與U之和占該鏈堿基含量的40%，經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個雙鏈 DNA，此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為

（以上過程不考慮引物）。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：19引用：1難度：0.7
解析

2．原位PCR技術是利用原位PCR儀，在組織或細胞中靶DNA所在的位置上進行的PCR循環(huán)擴增，通過摻入標記基因直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。進行擴增時，反應體系中的反應成分需滲透到組織或細胞的靶DNA處才能進行擴增。PCR反應體系中需要添加一定濃度的Mg²⁺，而組織細胞間的物質會吸附Mg²⁺，使進入細胞的Mg²⁺減少。下列說法正確的是（　?。?/h2>

A．PCR技術中復性是當溫度下降到65℃時，兩種引物與兩條DNA單鏈結合的過程

B．反應體系中dNTP作為擴增的原料，會依次連接到子鏈的5′端

C．反應體系中引物的G，C堿基含量越高越好，因為越高引物結合的特異性越強

D．原位PCR反應體系中使用的Mg²⁺濃度要比常規(guī)PCR高

發(fā)布：2024/10/31 21:0:2組卷：10引用：3難度：0.7

解析

3．在新冠病毒的核酸檢測過程中采用的逆轉錄PCR（RT-PCR），是聚合酶鏈式反應（PCR）的廣泛應用。在RT-PCR中，一條RNA鏈被逆轉錄成互補DNA，再以此為模板通過PCR進行DNA擴增，進而獲得檢測的目的基因S。下列關于RT-PCR的敘述錯誤的是（　　）

A．RT-PCR所用的酶包括逆轉錄酶和熱穩(wěn)定RNA聚合酶

B．RT-PCR所用的兩引物序列不同，兩者間可進行互補配對

C．RT-PCR過程中需添加ATP，反應過程中會有磷酸鍵斷裂

D．至少經(jīng)過2次循環(huán)，方可獲取與目的基因等長的DNA單鏈

發(fā)布：2024/10/31 0:0:1組卷：4引用：1難度：0.6

解析

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