科研人員將寒帶地區(qū)海魚體內(nèi)的抗凍基因?qū)肭ъㄒ环N番茄品種）細胞，成功培育出抗凍千禧果。如圖為培育過程中使用的 Ti質(zhì)粒示意圖，其中 Vir區(qū)的基因活化能促進T-DNA的加工和轉(zhuǎn)移?；卮鹣铝袉栴}：
（1）將抗凍基因的mRNA逆轉(zhuǎn)錄后，再進行PCR可獲得抗凍基因，該過程中所需要的酶是 逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶。每次PCR循環(huán)分為3步。其中所需溫度最低的一步的目的是 使引物結(jié)合到互補DNA 鏈上使引物結(jié)合到互補DNA 鏈上。
（2）抗凍基因不能直接導(dǎo)入受體細胞，需要構(gòu)建抗凍基因表達載體，構(gòu)建抗凍基因表達載體的目的是 有利于抗凍基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給下一代；有利于抗凍基因在受體細胞中表達和發(fā)揮作用有利于抗凍基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給下一代；有利于抗凍基因在受體細胞中表達和發(fā)揮作用（答出1點）。
（3）選擇圖中 Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體時，不能選擇限制酶Ⅱ切割 Ti質(zhì)粒。原因是 限制酶Ⅱ會破壞Vir區(qū)基因限制酶Ⅱ會破壞Vir區(qū)基因。最好選擇限制酶 ⅢⅢ構(gòu)建基因表達載體。
（4）為篩選成功導(dǎo)入抗凍基因的千禧果細胞，最好在培養(yǎng)基中添加 四環(huán)素四環(huán)素，將成功轉(zhuǎn)化的千禧果細胞誘導(dǎo)培育成植株，最后在 低溫（或寒冷）低溫（或寒冷）條件下篩選出具有抗凍性狀的千禧果植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶；使引物結(jié)合到互補DNA 鏈上；有利于抗凍基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給下一代；有利于抗凍基因在受體細胞中表達和發(fā)揮作用；限制酶Ⅱ會破壞Vir區(qū)基因；Ⅲ；四環(huán)素；低溫（或寒冷）
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/4 8:0:9組卷：3引用：2難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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