去年年初，國內(nèi)牛奶制品因為牧草進口成本上漲而漲價的現(xiàn)象引起了人們的關注。紫花苜蓿是一種重要的牧草，某研究團隊擬將耐鹽基因HLAl導入紫花苜蓿中培育耐鹽牧草，具體實驗流程如圖甲，圖乙是載體pCHLAl中T-DNA示意圖?；卮鹣铝袉栴}：
（1）過程②為 基因表達載體基因表達載體的構建，是基因工程的核心，此過程需要使用的酶是 限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）和DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）和DNA連接酶。
（2）過程③常用的轉化方法是 農(nóng)桿菌轉化法農(nóng)桿菌轉化法，轉化是指 目的基因進入受體細胞內(nèi)并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程目的基因進入受體細胞內(nèi)并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。
（3）已知Basta是一種除草劑，則為達到培養(yǎng)并篩選的目的，過程④的培養(yǎng)基所含的成分必須有無機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)、植物激素、Basta（必須同時回答到這兩種成分）植物激素、Basta（必須同時回答到這兩種成分）。
（4）過程④得到的幼苗 不一定不一定（填“一定”或“一定不”或“不一定”）含有HLAl基因，為進一步確認，可用PCR擴增的方法進行鑒定，則進行PCR反應的引物應根據(jù) HLA1基因序列HLA1基因序列設計，PCR的原理是 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制。
（5）要檢測目的基因是否插入到苜蓿細胞的染色體DNA上，可采用 DNA分子雜交DNA分子雜交技術。
（6）判斷本實驗的目的是否表達成功，還應進行 耐鹽檢測（或鑒定）耐鹽檢測（或鑒定）實驗。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因表達載體；限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）和DNA連接酶；農(nóng)桿菌轉化法；目的基因進入受體細胞內(nèi)并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程；植物激素、Basta（必須同時回答到這兩種成分）；不一定；HLA1基因序列；DNA雙鏈復制；DNA分子雜交；耐鹽檢測（或鑒定）
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/12/1 11:30:1組卷：13引用：2難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6