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去年年初,國內(nèi)牛奶制品因為牧草進口成本上漲而漲價的現(xiàn)象引起了人們的關(guān)注。紫花苜蓿是一種重要的牧草,某研究團隊擬將耐鹽基因HLAl導(dǎo)入紫花苜蓿中培育耐鹽牧草,具體實驗流程如圖甲,圖乙是載體pCHLAl中T-DNA示意圖?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)過程②為
基因表達載體
基因表達載體
的構(gòu)建,是基因工程的核心,此過程需要使用的酶是
限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)和DNA連接酶
限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)和DNA連接酶
。
(2)過程③常用的轉(zhuǎn)化方法是
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
,轉(zhuǎn)化是指
目的基因進入受體細胞內(nèi)并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程
目的基因進入受體細胞內(nèi)并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程
。
(3)已知Basta是一種除草劑,則為達到培養(yǎng)并篩選的目的,過程④的培養(yǎng)基所含的成分必須有無機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)、
植物激素、Basta(必須同時回答到這兩種成分)
植物激素、Basta(必須同時回答到這兩種成分)
。
(4)過程④得到的幼苗
不一定
不一定
(填“一定”或“一定不”或“不一定”)含有HLAl基因,為進一步確認,可用PCR擴增的方法進行鑒定,則進行PCR反應(yīng)的引物應(yīng)根據(jù)
HLA1基因序列
HLA1基因序列
設(shè)計,PCR的原理是
DNA雙鏈復(fù)制
DNA雙鏈復(fù)制
。
(5)要檢測目的基因是否插入到苜蓿細胞的染色體DNA上,可采用
DNA分子雜交
DNA分子雜交
技術(shù)。
(6)判斷本實驗的目的是否表達成功,還應(yīng)進行
耐鹽檢測(或鑒定)
耐鹽檢測(或鑒定)
實驗。

【答案】基因表達載體;限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)和DNA連接酶;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;目的基因進入受體細胞內(nèi)并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程;植物激素、Basta(必須同時回答到這兩種成分);不一定;HLA1基因序列;DNA雙鏈復(fù)制;DNA分子雜交;耐鹽檢測(或鑒定)
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:13引用:2難度:0.7
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  • 1.運用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法,將抗菜青蟲的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中,培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲的油菜品種,這一品種在生長過程中能產(chǎn)生特異的殺蟲蛋白質(zhì),對菜青蟲有顯著抗性,能大大減輕菜青蟲對油菜的危害,提高油菜產(chǎn)量,減少農(nóng)藥使用,據(jù)以上信息,下列敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/7 11:0:1組卷:104引用:32難度:0.7
  • 菁優(yōu)網(wǎng)2.圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?;卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長;-表示不生長。
    (1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換,構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    (3)導(dǎo)入目的基因時,首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞,再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    (4)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上,挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測受體細胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21引用:3難度:0.6
  • 3.在碳反應(yīng)中,RuBP羧化酶(R酶)可以催化CO2的固定,R酶由大亞基蛋白(L)和小亞基蛋白(S)組成。高等植物細胞中L由葉綠體基因編碼并在葉綠體中合成,S由細胞核基因編碼并在細胞溶膠中的核糖體合成后進入葉綠體,與L組裝成有功能的酶。研究發(fā)現(xiàn),原核生物藍藻(藍細菌)R酶的活性高于高等植物。研究人員將藍藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物(甲)的葉綠體DNA中,同時去除甲的L基因。轉(zhuǎn)基因植株能夠存活生長。檢測結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因植株中的R酶活性高于未轉(zhuǎn)基因的正常植株。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/7 8:0:2組卷:5引用:1難度:0.5
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