目前全球肆虐的病毒是一種以前尚未在人類中發(fā)現(xiàn)的新型冠狀病毒，命名為2019-nCoV（以下簡(jiǎn)稱nCoV）。它具有已知RNA病毒中最大的基因組，單鏈RNA大小為3萬(wàn)個(gè)堿基左右。結(jié)構(gòu)如圖。

疫苗預(yù)防
針對(duì)該病毒現(xiàn)在還沒有具有針對(duì)性的特效藥，因此各國(guó)都寄希望于研制出針對(duì)該病毒的疫苗。疫苗分為以下5種：滅活疫苗，減毒活疫苗，重組蛋白疫苗，核酸疫苗，重組病毒載體疫苗。
（1）重組蛋白疫苗：中科院微生物所動(dòng)物試驗(yàn)階段
可以讓大腸桿菌表達(dá)出nCoV的S蛋白，打進(jìn)人體，讓免疫系統(tǒng)針對(duì)該蛋白產(chǎn)生抗體。該過(guò)程需要將S蛋白基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌體內(nèi)，你認(rèn)為對(duì)該過(guò)程描述合理的是

ACD

ACD

（多選）
A．用PCR可以短時(shí)間獲得大量的S蛋白基因，根據(jù)需要在基因兩端加上的限制性酶切位點(diǎn)可以不同
B．該過(guò)程的表達(dá)載體上要具有復(fù)制原點(diǎn)、起始密碼子、終止密碼子、抗生素抗性基因和S蛋白基因
C．通過(guò)Ca²⁺處理大腸桿菌以獲得感受態(tài)細(xì)胞，該狀態(tài)的細(xì)胞能夠提高表達(dá)載體整合到擬核上的效率
D．能夠利用大腸桿菌DNA擴(kuò)增出目的基因，說(shuō)明成功導(dǎo)入了S蛋白基因，是否表達(dá)S蛋白還需要抗體檢測(cè)
（2）獲得的工程菌需要篩選才能投入疫苗的生產(chǎn)，下列于此過(guò)程有關(guān)表述正確的是

ACD

ACD

（多選）
A．篩選和鑒定菌種要在培養(yǎng)基中加入瓊脂，大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)黑色菌落
B．培養(yǎng)基配制過(guò)程要稱量、溶化、滅菌，倒平板之前調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍以利于細(xì)菌繁殖
C．如果需要計(jì)數(shù)，則用稀釋涂布平板法涂布平板之后對(duì)菌落計(jì)數(shù)，顯微鏡直接觀察值可能偏小
D．將高產(chǎn)S蛋白的菌種保存起來(lái)可以用4℃臨時(shí)保藏和-20℃甘油管藏等方法，后者保存時(shí)間長(zhǎng)
（3）工程菌操作整個(gè)過(guò)程需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作，下列無(wú)菌操作方式合理的有

CD

CD

（多選）
A．每次使用接種環(huán)前后都要進(jìn)行灼燒滅菌，但是灼燒之后要置于菌液冷卻才能使用
B．液體培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌，加了瓊脂的固體培養(yǎng)基可以用干熱滅菌箱滅菌
C．操作者雙手應(yīng)該用酒精擦拭消毒，但是該過(guò)程不能完全殺死微生物的芽孢和孢子
D．倒平板凝固后要將培養(yǎng)皿倒置，目的是防止水分過(guò)快蒸發(fā)以及冷凝水回滴造成污染
（4）核酸疫苗：美國(guó)人體試驗(yàn)階段（未做動(dòng)物試驗(yàn)）
將S蛋白對(duì)應(yīng)的mRNA用脂膜包裹打進(jìn)人體，讓它在細(xì)胞里表達(dá)病毒的S蛋白。以下對(duì)該方法的誤解是

AC

AC

（多選）
A．核酸注入人體細(xì)胞只會(huì)造成體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生變化，并不影響生殖細(xì)胞
B．該過(guò)程流程大大簡(jiǎn)化，節(jié)省了重組蛋白疫苗的生產(chǎn)S蛋白的時(shí)間
C．mRNA如果成功進(jìn)入細(xì)胞，翻譯產(chǎn)生的S蛋白就可以在細(xì)胞內(nèi)對(duì)抗病毒
D．核酸外脂膜與細(xì)胞膜融合，幫助核酸進(jìn)入細(xì)胞指導(dǎo)S蛋白的翻譯
（5）重組病毒載體疫苗：軍事科學(xué)院臨床Ⅱ期階段（動(dòng)物試驗(yàn)和臨床Ⅰ期完成）
是把nCoV的部分基因植入到不致病但侵染能力很強(qiáng)的腺病毒載體里，重組成新病毒。任何疫苗在大規(guī)模使用前，最好通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)再進(jìn)行臨床試驗(yàn)。大規(guī)模試驗(yàn)用哺乳動(dòng)物一般用小鼠，但是小鼠沒有人類ACE2蛋白，因此獲得大量人源ACE2轉(zhuǎn)基因小鼠成為動(dòng)物疫苗試驗(yàn)的重要步驟。在此過(guò)程中下 列表述合理的是

ACD

ACD

（多選）
A．鑒于人類基因組測(cè)序已經(jīng)完成，既可以從人類基因組文庫(kù)中獲取目的基因，又可以從cDNA文庫(kù)中獲取
B．鑒于小鼠也是真核生物，既可以將人類ACE2完整的基因?qū)胄∈篌w內(nèi)，又可以導(dǎo)入無(wú)內(nèi)含子的目 的基因
C．鑒于受體細(xì)胞是小鼠的受精卵細(xì)胞，重組DNA分子導(dǎo)入最好用顯微注射的方法，該方法不適合原核生物細(xì)胞
D．如果有轉(zhuǎn)人源ACE2基因小鼠若干，要在短時(shí)間獲得大量實(shí)驗(yàn)小鼠，可用核移植的方法克隆很多小鼠