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[生物一選修3：現(xiàn)代生物科技專題]
基因工程是花卉培養(yǎng)中的一種重要技術(shù)手段，這能夠培養(yǎng)出不少新品種的花卉。如圖為利用矮牽?；ㄖ芯幋a3，5-羥氧化酶的基因（HE）改造玫瑰，培育能夠產(chǎn)生藍色花冠玫瑰的新品種時的技術(shù)流程圖。圖中Te^r、Ap^r、NPTⅡ分別表示四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、氨基糖苷類-3-磷酸轉(zhuǎn)移酶基因。請分析回答下列問題：

（1）基因工程的核心步驟是
基因表達載體的構(gòu)建
基因表達載體的構(gòu)建
。
（2）從矮牽?；毎蝎@得目的基因后，對其擴增的技術(shù)叫
PCR
PCR
，這種技術(shù)手段需要用到的一種特殊工具酶是
Taq酶
Taq酶
。
（3）根據(jù)圖示分析，為了便于后期篩選成功導(dǎo)入大分子A的農(nóng)桿菌，選擇的限制酶的種類是
SalⅠ、EcoRⅠ
SalⅠ、EcoRⅠ
，限制酶的作用是
識別特定的DNA序列，并在特定位點切割DNA分子
識別特定的DNA序列，并在特定位點切割DNA分子
。
（4）構(gòu)建基因表達載體時，一般將目的基因插在啟動子和終止子之間，其中啟動子的作用是作為
RNA聚合
RNA聚合
酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達出人類所需蛋白質(zhì)。
（5）成功導(dǎo)入大分子A的農(nóng)桿菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基、含氨芐青霉素培養(yǎng)基、同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上的生存狀況應(yīng)該是
能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
。
（6）檢測HE是否成功插人到染色體DNA上，檢測方法是采用
DNA分子雜交法
DNA分子雜交法
。

【答案】基因表達載體的構(gòu)建；PCR；Taq酶；SalⅠ、EcoRⅠ；識別特定的DNA序列，并在特定位點切割DNA分子；RNA聚合；能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存；DNA分子雜交法

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：4引用：1難度：0.6

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1．番茄含有豐富的維生素，但不耐寒?？茖W(xué)家將魚的抗凍蛋白基因?qū)敕鸭毎?，并進行組織培養(yǎng)得到轉(zhuǎn)基因番茄植株，并將該植株種植在寒冷環(huán)境中，發(fā)現(xiàn)番茄植株并無抗寒性狀。為了找出不抗寒的原因，科學(xué)家提取轉(zhuǎn)基因番茄細胞中的有關(guān)成分進行了如下分析?；卮鹣铝袉栴}：
（1）提取細胞中的

，采用抗原―抗體雜交技術(shù)進行檢測，若能檢測到抗凍蛋白，但含量非常少，其原因可能是

。魚的抗凍蛋白基因能在番茄細胞內(nèi)成功表達的理論基礎(chǔ)是

。
（2）若經(jīng)上一步檢測確定細胞中無抗凍蛋白，可采用分子雜交技術(shù)檢測細胞中的RNA和DNA。該技術(shù)依據(jù)的原理是

，檢測過程中需使用DNA探針進行檢測，若出現(xiàn)DNA―RNA的雜交帶，說明

，則可能是

導(dǎo)致無抗凍蛋白。
（3）若經(jīng)檢測確定細胞中無抗凍蛋白的mRNA，使用DNA探針對細胞內(nèi)的基因組DNA進行檢測，若出現(xiàn)DNA―DNA的雜交帶，說明

，則可能是抗凍蛋白基因反向插入質(zhì)粒中導(dǎo)致抗凍蛋白基因無法正常表達。若經(jīng)檢測確定細胞中無抗凍蛋白基因，說明在轉(zhuǎn)化過程中，可能導(dǎo)入番茄細胞的是

（填“普通質(zhì)?！被颉爸亟M質(zhì)?！保?。
發(fā)布：2024/11/8 11:0:1組卷：5引用：1難度：0.5
解析

2．運用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法，將抗菜青蟲的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中，培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲的油菜品種，這一品種在生長過程中能產(chǎn)生特異的殺蟲蛋白質(zhì)，對菜青蟲有顯著抗性，能大大減輕菜青蟲對油菜的危害，提高油菜產(chǎn)量，減少農(nóng)藥使用，據(jù)以上信息，下列敘述正確的是（　?。?/h2>

A．Bt基因的化學(xué)成分是蛋白質(zhì)

B．Bt基因中有菜青蟲的遺傳物質(zhì)

C．轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜能產(chǎn)生殺蟲蛋白是由于具有Bt基因

D．轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜產(chǎn)生的殺蟲蛋白是無機物

發(fā)布：2024/11/7 11:0:1組卷：104引用：32難度：0.7

解析

3．CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細胞，一時間讓國內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱是嵌合抗原受體T細胞療法，CAR-T療法的操作步驟是：①直接采取患者的外周血，分離出其中的T淋巴細胞；②將分離的T淋巴細胞在體外進行實驗室培養(yǎng)改造，裝載上具有識別腫瘤抗原的受體及其刺激分子，形成CAR-T細胞；③將CAR-T細胞在體外進行培養(yǎng)，大量擴增讓其數(shù)量成倍增加；④體外擴增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而識別并攻擊自身的腫瘤細胞。改造細胞回輸體內(nèi)后，這些細胞一旦遇見表達對應(yīng)抗原的腫瘤細胞，便會被激活并再擴增，發(fā)揮其極大的特異殺傷力，殺死癌細胞。回答下列問題：
（1）從患者體內(nèi)分離的T淋巴細胞，需要對其進行基因工程改造，以得到CAR-T細胞。
①基因工程最核心的步驟是

。
②構(gòu)建基因表達載體時，一般將目的基因插在啟動子和終止子之間。啟動子的作用是

。
③可以通過PCR技術(shù)獲得大量目的基因，利用該技術(shù)時擴增目的基因時每次循環(huán)可分為

三步，其中第三步所使用的酶是

。
（2）體外培養(yǎng)患者CAR-T細胞時，不僅要確保

的環(huán)境條件，還要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是

。
（3）結(jié)合題干信息分析，CAR-T療法價格高昂的原因可能是

（答出2點即可）。
發(fā)布：2024/11/8 11:59:57組卷：3引用：2難度：0.5
解析

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