如圖是利用現(xiàn)代生物技術(shù)獲取轉(zhuǎn)基因羊的流程圖,并利用PCR技術(shù)檢測目的基因的轉(zhuǎn)錄水平來推斷目的基因的表達情況?;卮鹣铝袉栴}:
(1)采用PCR技術(shù)獲得大量的目的基因進行體外擴增,其前提是 要有一段已知的目的基因的核苷酸序列要有一段已知的目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR過程所需的酶是 Taq酶(或熱穩(wěn)定DNA聚合酶)Taq酶(或熱穩(wěn)定DNA聚合酶)。
(2)PCR擴增時,退火溫度的設(shè)定與引物長度、堿基組成有關(guān),長度相同但 G-C堿基對含量高(或C、G堿基含量高)G-C堿基對含量高(或C、G堿基含量高)的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。
(3)圖中A過程需要 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶參與,若利用PCR技術(shù)擴增目的基因的過程中消耗了126個引物分子,則該過程DNA擴增了 66次。
(4)RT-PCR是將RNA逆轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù),利用RT-PCR技術(shù)獲取的目的基因 能能(填“能”或“不能”)在物種之間交流。該技術(shù)還可用于對某些微量RNA病毒的檢測,能提高檢測的靈敏度,原因是 增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量(或濃度),便于檢測增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量(或濃度),便于檢測。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】要有一段已知的目的基因的核苷酸序列;Taq酶(或熱穩(wěn)定DNA聚合酶);G-C堿基對含量高(或C、G堿基含量高);逆轉(zhuǎn)錄;6;能;增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量(或濃度),便于檢測
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:2難度:0.7
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.PCR技術(shù)不僅可以擴增目的基因,還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR,其操作步驟為:
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物,得到兩個常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物,突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物;
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增,得到突變目的基因序列。回答下列問題:
(1)PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān),DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
(2)在第一次PCR反應(yīng)中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過
(3)如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物,其步驟包括:發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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