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堿性蛋白酶廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)療等行業(yè)。為了實(shí)現(xiàn)低成本高產(chǎn)量的目標(biāo),研究人員通過誘變技術(shù)獲得高效分泌堿性蛋白酶的地衣芽孢桿菌,再利用基因工程手段將該地衣芽孢桿菌的堿性蛋白酶基因(Apr)導(dǎo)入大腸桿菌,構(gòu)建了表達(dá)胞外堿性蛋白酶的重組菌株?;卮鹣铝袉栴}:
(1)在誘變技術(shù)處理的過程中,地衣芽孢桿菌發(fā)生了
基因突變
基因突變
(填“變異類型”)。由于該種變異具有
不定向性
不定向性
的特點(diǎn),故誘變后還需經(jīng)過
篩選
篩選
才有可能獲得高效分泌堿性蛋白酶的芽孢桿菌。
(2)Apr基因兩端的核苷酸序列已知,如圖1所示。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Apr基因所需要的引物是下列中的
AB
AB


A.5′-GGATCTAACGCGATACGC-3′
B.5′-CTCGAGCCGGAAATACTT-3′
C.5′-AAGTATTTCCGGCTCGAG-3′
D.5′-GCGTATCGCGTTAGATCC-3′
(3)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳結(jié)果顯示,除目的基因條帶外,還有2條非特異條帶,可能的原因有:
①②
①②
(填序號),導(dǎo)致引物與模板中的非目的基因片段結(jié)合。
①引物序列較短
②引物和模板不完全配對
③復(fù)性溫度過高
(4)構(gòu)建基因表達(dá)載體時需要的工具酶有
限制酶、DNA連接酶
限制酶、DNA連接酶
。如圖是2已構(gòu)建的重組表達(dá)載體pET-28b(+)-Apr示意圖,研究人員用XhoⅠ和NcoⅠ兩種酶(酶切位點(diǎn)見圖2,數(shù)字代表該位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)的距離)對重組菌株的DNA進(jìn)行雙酶切,若得到約為
1110
1110
bp和
5231
5231
bp的DNA片段,則初步表明目的基因已成功導(dǎo)入到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)。

【答案】基因突變;不定向性;篩選;AB;①②;限制酶、DNA連接酶;1110;5231
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:22引用:1難度:0.5
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    (1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
     
    (填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”)。可利用定點(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體,常用
     
    將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞,還需用到植物細(xì)胞工程中的
     
    技術(shù),才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
    (2)PCR過程所依據(jù)的原理是
     
    。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增,若將一個目的基因復(fù)制10次,則需要在緩沖液中至少加入
     
    個引物。
    (3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
     
    ??蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大,可能的原因是
     

    (4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是
     
    。
    A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
    B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
    C.人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
    D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克隆),可以獲得多個具有外源基因的后代

    發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6
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    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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