重組人胰島素是世界上第一個基因工程藥物，它的使用造福了億萬糖尿病患者。興趣小組探究工程菌的構(gòu)建，實驗所用質(zhì)粒載體如圖所示，其中LacZ基因的表達產(chǎn)物能將無色反應(yīng)物X-gal水解，從而使菌落呈藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色；Ampr基因的表達產(chǎn)物分泌到細(xì)胞外發(fā)揮作用。本實驗所用的受體大腸桿菌無LacZ基因。
（1）將表達載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：一般先用Ca2+處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于 一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達載體導(dǎo)入其中。
（2）雙重篩選培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入 氨芐青霉素氨芐青霉素用以篩選出導(dǎo)入了質(zhì)粒載體的受體菌（轉(zhuǎn)化子），培養(yǎng)基中加入 X-galX-gal用以鑒別出含重組質(zhì)粒的受體菌（重組子）。重組子的菌落顏色是 白色白色，原因是 重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色。
（3）長時間培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)化子形成的菌落周圍出現(xiàn)了一些非轉(zhuǎn)化子形成的較小菌落，這些非轉(zhuǎn)化子菌落形成的原因是 培養(yǎng)時間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效培養(yǎng)時間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；氨芐青霉素；X-gal；白色；重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色；培養(yǎng)時間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/28 8:0:9組卷：0引用：2難度：0.5
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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