當(dāng)前位置： 2023-2024學(xué)年天津市武清區(qū)楊村一中高三（上）開(kāi)學(xué)生物試卷> 試題詳情

三氯生是一種抑苗物質(zhì)，可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細(xì)胞。2021年某科研團(tuán)隊(duì)通過(guò)先篩選出一種對(duì)三氯生抵抗性較強(qiáng)的重組質(zhì)粒，再將可以受溫度調(diào)控的基因插入該質(zhì)粒上，構(gòu)建了溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒。

（1）圖1中，步驟Ⅰ需要的工具酶是
限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
；步驟Ⅱ常用的方法是用
Ca²⁺
Ca²⁺
處理使細(xì)菌成為感受態(tài)細(xì)胞；為達(dá)到步驟Ⅰ預(yù)期的篩選目的，所用物質(zhì)X最可能為
三氯生
三氯生
。
（2）已知fabV基因（-A和-B代表從不同苗中獲得）可以使大腸桿菌抵抗三氯生。在圖中，fabV-A基因和fabV-B基因是
目的
目的
（目的/標(biāo)記）基因。
（3）利用從細(xì)菌中提取的DNA通過(guò)PCR技術(shù)獲取fabV-A基因時(shí)，需要的特定酶是
Taq酶
Taq酶
。該酶只能從引物的
3'
3'
端延伸DNA鏈，而不能從頭開(kāi)始合成DNA，因此需要先根據(jù)
目的基因fabV-B基因兩端序列
目的基因fabV-B基因兩端序列
設(shè)計(jì)兩種特異性引物序列。
（4）為獲得一種增強(qiáng)大腸桿菌對(duì)三氯生的抵抗作用效果較好的重組質(zhì)粒，將含有不同質(zhì)粒的大腸桿菌分別接種到相應(yīng)培養(yǎng)基中。培養(yǎng)一段時(shí)間后，結(jié)果如圖2，則適宜選作構(gòu)建溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒的是
（重組質(zhì)粒）pEA
（重組質(zhì)粒）pEA
。
（5）科學(xué)家對(duì)上述選出質(zhì)粒進(jìn)行改造，獲得了圖3所示質(zhì)粒。其中P₁和P₂是啟動(dòng)子，可以啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；C基因在低溫下會(huì)抑制P₁；R基因在高溫下會(huì)抑制P₂；T₁和T₂是終止子，可以終止轉(zhuǎn)錄。如果將lacZ基因和GFP基因插入圖質(zhì)粒中，使得最后表現(xiàn)為高溫下只表達(dá)GFP蛋白，而低溫下只表達(dá)lacZ蛋白。則以下說(shuō)法正確的有
AD
AD
。
A.GFP基因插在R基因和終止子T₁之間
B.lacZ基因插在R基因和終止子T₁之間
C.GFP基因插在啟動(dòng)子P₂和終止子T₂之間
D.lacZ基因插在啟動(dòng)子P₂和終止子T₂之間

【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．

【答案】限制酶和DNA連接酶；Ca²⁺；三氯生；目的；Taq酶；3'；目的基因fabV-B基因兩端序列；（重組質(zhì)粒）pEA；AD

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/8/5 8:0:8組卷：3引用：1難度：0.5

相似題

1．科研小組利用基因工程技術(shù)將“抗蟲(chóng)基因”轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞成功培育出抗蟲(chóng)棉，該技術(shù)所用的含“抗蟲(chóng)基因”的DNA與質(zhì)粒上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示（不同限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)：BamHⅠ5′-G^↓GATCC-3′，BclⅠ5′-T^↓GATCA-3′，Sau3AⅠ5′-^↓GATC-3′，HindⅢ5′-A^↓AGCTT-3′）。請(qǐng)分析并回答以下問(wèn)題：

（1）將抗蟲(chóng)基因轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞前，可以通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得大量抗蟲(chóng)基因，PCR擴(kuò)增前應(yīng)根據(jù)

設(shè)計(jì)引物。培育轉(zhuǎn)基因棉花的核心工作是

。由圖1和圖2分析可知，研究人員應(yīng)選擇

限制酶處理含抗蟲(chóng)基因的DNA片段，在處理質(zhì)粒的時(shí)候應(yīng)選擇

限制酶。
（2）蛋白酶抑制劑基因也是一種抗蟲(chóng)基因，某研究團(tuán)隊(duì)將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨(dú)或共同轉(zhuǎn)化，獲得轉(zhuǎn)基因植株。
①將抗蟲(chóng)基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)時(shí)，除了采用我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的花粉管通道法，還可以采用

法，使用該方法時(shí)，應(yīng)將抗蟲(chóng)基因插入到質(zhì)粒的

區(qū)域。
②標(biāo)記基因可用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入，由圖2可知，應(yīng)選含有

的培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的細(xì)胞。為了檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否穩(wěn)定表達(dá)，在分子水平上的檢測(cè)方法為

。
③圖3為將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨(dú)或共同轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，據(jù)結(jié)果分析，

（選填“NaPI”或“StpinlA”或“NaPI+StpinlA”）轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲(chóng)效果最佳，得出該結(jié)論的原因是

。
發(fā)布：2024/11/19 5:30:2組卷：38引用：2難度：0.5
解析

2．某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲(chóng)基因和Bt2抗蟲(chóng)基因的編碼序列，并運(yùn)用交錯(cuò)延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲(chóng)性能強(qiáng)的重組B基因，轉(zhuǎn)入煙草獲得成功，過(guò)程如圖所示。下列選項(xiàng)正確的是（　　）

注：①交錯(cuò)延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作為模板，所需引物相同，圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動(dòng)子Pr1a可在煙草葉肉細(xì)胞中特異性啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長(zhǎng)素合成酶基因是通過(guò)成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段，可使植物細(xì)胞合成生長(zhǎng)素。

A．若用EcoRⅠ（5'-G↓AATTC-3'）和限制酶XmaⅠ（5'-G↓CCGGG-3'）雙酶切多個(gè)目的基因，能避免兩個(gè)目的基因連接成環(huán)

B．復(fù)制原點(diǎn)是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)

C．在培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加卡那霉素可以篩選含有Bt重組基因的細(xì)胞

D．圖中生長(zhǎng)素合成酶基因不能促進(jìn)愈傷組織生根

發(fā)布：2024/11/16 21:0:1組卷：36引用：2難度：0.5

解析

3．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />

A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列

B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進(jìn)行子鏈合成

C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞

D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

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3．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />

3．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />