寨卡病毒（ZIKV）是一種可通過蚊蟲叮咬等途徑傳播的單股正鏈RNA病毒，該病毒編碼的NS2B蛋白在病毒復(fù)制、組裝及致病過程中具有重要作用。通過基因工程技術(shù)構(gòu)建攜帶NS2B基因的重組原核表達質(zhì)粒，采用大腸桿菌作為表達菌株，通過誘導(dǎo)表達。純化獲得NS2B目的蛋白。用純化后的NS2B蛋白通過如圖示過程制備抗NS2B蛋白的單克隆抗體，圖中X、Y表示相關(guān)細胞。請回答下列相關(guān)問題：
（1）通過基因工程技術(shù)構(gòu)建可表達 NS2B蛋白大腸桿菌菌株，該操作技術(shù)的核心是 基因表達載體的構(gòu)建基因表達載體的構(gòu)建。首先需獲得NS2B蛋白合成基因，其途徑為：提取 ZIKV的 RNA，通過 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程獲取相應(yīng)的 DNA，再利用限制性核酸內(nèi)切酶選擇性切割 DNA獲得NS2B蛋白合成基因。
（2）通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)對 NS2B蛋白合成基因進行擴增，與常態(tài)酶不同，該過程使用的聚合酶必須要 耐高溫耐高溫，循環(huán)流程是 變性--退火（復(fù)性）--延伸變性--退火（復(fù)性）--延伸。
（3）圖中對X進行篩選需要做 專一抗體專一抗體檢測，通過篩選獲得的細胞 Y具有的特點是 既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性的抗體既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性的抗體。
（4）當(dāng)前新冠肺炎正在危害全球人類的健康，依據(jù)上述防治寨卡病毒（ZIKV）的現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)原理；請你提出針對新冠肺炎單克隆抗體生產(chǎn)及新冠肺炎治療的方案，簡述方案設(shè)計思路 獲得能編碼新冠肺炎病毒特異性蛋白的基因，通過基因工程獲得新冠肺炎病毒特異性蛋白，制備篩選出能產(chǎn)生抗新冠肺炎病毒特異性蛋白抗體的雜交瘤細胞，制備對新冠肺炎有免疫能力的單克隆抗體，給感染者注射治療獲得能編碼新冠肺炎病毒特異性蛋白的基因，通過基因工程獲得新冠肺炎病毒特異性蛋白，制備篩選出能產(chǎn)生抗新冠肺炎病毒特異性蛋白抗體的雜交瘤細胞，制備對新冠肺炎有免疫能力的單克隆抗體，給感染者注射治療。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】基因表達載體的構(gòu)建；逆轉(zhuǎn)錄；耐高溫；變性--退火（復(fù)性）--延伸；專一抗體；既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性的抗體；獲得能編碼新冠肺炎病毒特異性蛋白的基因，通過基因工程獲得新冠肺炎病毒特異性蛋白，制備篩選出能產(chǎn)生抗新冠肺炎病毒特異性蛋白抗體的雜交瘤細胞，制備對新冠肺炎有免疫能力的單克隆抗體，給感染者注射治療
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：11引用：2難度：0.7
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1．CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6～5倍，導(dǎo)致吞噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，為此他們按照如圖流程進行了實驗。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：7引用：3難度：0.6 -
2．雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細胞技術(shù)（免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題：
（1）與植物體細胞雜交相比，圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是，過程②選用的骨髓瘤細胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長。
（2）對③篩選出的雜交瘤細胞，還需進行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點是（答出一點）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細胞。體外培養(yǎng)到一定時期的單克隆雜交—雜交瘤細胞會因為、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進行傳代培養(yǎng)。
（4）與直接使用長春堿相比，將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對人體的副作用更小，原因是。發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：21引用：4難度：0.5 -
3．使用高效的細胞毒素藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞但細胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用?？贵w一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細胞毒素）三部分組成，它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7
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