人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了如圖1過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)中,為防止有害代謝物的積累,可采用
定期更換培養(yǎng)液
定期更換培養(yǎng)液
的方法。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠1次,共注射3次,其目的是 加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞
加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞
,最后一次免疫后第3天,取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,常用的化學(xué)誘導(dǎo)因素是 聚乙二醇(PEG)
聚乙二醇(PEG)
。
(2)甲、乙、丙中,只含雜交瘤細(xì)胞的是 乙和丙
乙和丙
,②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè),之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè),并多次重復(fù)上述操作,其目的是篩選獲得 能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞
能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞
。
(3)酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法,具體原理如圖2所示:
據(jù)圖分析,固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合,這是由于不同抗體能與同一抗原表面的 不同部位
不同部位
結(jié)合。該檢測(cè)方法中,酶標(biāo)抗體的作用是 抗體與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化特定底物反應(yīng)
抗體與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化特定底物反應(yīng)
,可通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物量來(lái)判斷待測(cè)抗原量。