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家禽飼料中富含纖維素,但家禽消化道中缺少降解纖維素的酶,阻礙了家禽對飼料的吸收與利用。研究人員從枯草芽孢桿菌中分離出編碼纖維素酶的W基因,并借助圖1所示的質(zhì)粒載體導(dǎo)入到乳酸桿菌體內(nèi),以提高添加乳酸桿菌飼料的利用率,節(jié)省成本。圖2為克隆得到的含W基因的DNA片段?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識別和結(jié)合的部位。多數(shù)啟動子具有物種特異性,為滿足應(yīng)用需要,在圖1質(zhì)粒中插入W基因的上游應(yīng)選擇
乳酸桿菌
乳酸桿菌
(填“枯草芽孢桿菌”或“乳酸桿菌”)的啟動子。
(2)分析上述兩圖可知,應(yīng)使用限制酶
EcoRⅠ和HindⅢ
EcoRⅠ和HindⅢ
切割質(zhì)粒和含W基因的DNA片段,以獲得W基因能正確連接的重組質(zhì)粒。所得重組質(zhì)粒導(dǎo)入到乳酸桿菌后,使用含抗生素
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的培養(yǎng)基篩選,以得到成功導(dǎo)入W基因的乳酸桿菌。
(3)將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為甲、乙、丙三組,其中甲組接種乳酸桿菌,乙組接種導(dǎo)入重組質(zhì)粒的乳酸桿菌,丙組接種導(dǎo)入普通質(zhì)粒的乳酸桿菌。相同條件下培養(yǎng)一段時間,發(fā)現(xiàn)甲、丙兩組培養(yǎng)基中纖維素的含量無變化,而乙組含量下降,試從分子水平簡要闡述出現(xiàn)上述結(jié)果的原因:
W基因在乳酸桿菌中成功表達(dá)出分解纖維素的酶
W基因在乳酸桿菌中成功表達(dá)出分解纖維素的酶

(4)有人認(rèn)為,增加導(dǎo)入W基因的數(shù)量會提高轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌降解纖維素的能力。請設(shè)計一個實驗方案加以判定。(簡要寫出實驗思路)
將不同拷貝數(shù)的W基因分別導(dǎo)入乳酸桿菌體內(nèi),比較各轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌降解纖維素的能力差異
將不同拷貝數(shù)的W基因分別導(dǎo)入乳酸桿菌體內(nèi),比較各轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌降解纖維素的能力差異

【答案】RNA聚合酶;乳酸桿菌;EcoRⅠ和HindⅢ;氨芐青霉素;W基因在乳酸桿菌中成功表達(dá)出分解纖維素的酶;將不同拷貝數(shù)的W基因分別導(dǎo)入乳酸桿菌體內(nèi),比較各轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌降解纖維素的能力差異
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:5引用:1難度:0.6
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  • 1.尖孢鐮刀菌會引起黃瓜枯萎病的發(fā)生。研究人員從土壤中分離篩選出對黃瓜枯萎病有抑制效果的拮抗細(xì)菌(jb9菌株),為黃瓜枯萎病提供生物防治。實驗過程如圖1所示,回答下列問題:
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    (1)將土壤樣品制成懸浮液,步驟Ⅰ使用的接種方法是
     
    ,獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是
     
    。培養(yǎng)基a必備的營養(yǎng)物質(zhì)有
     
    。
    (2)為驗證jb9菌株的抑菌效果,需要先將尖孢鐮刀菌均勻接種在培養(yǎng)基b表面,濾紙組作為對照組,用
     
    處理濾紙。
    (3)Jb9菌株能合成分泌真菌細(xì)胞壁降解酶(HCD),抑制尖孢鐮刀菌(真菌)的生長。科研人員將獲取的HCD基因?qū)朦S瓜細(xì)胞,培育抗枯萎病的轉(zhuǎn)基因植株。圖2所示:含HCD基因的DNA片段、質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及限制酶切割位點。
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    ①根據(jù)題意,將HCD基因與圖示的質(zhì)粒重組,應(yīng)選用的限制酶是
     
    。在篩選培養(yǎng)基上,要加入
     
    來篩選含有HCD基因的受體細(xì)胞。將受體細(xì)胞培育后獲得轉(zhuǎn)基因植株。
    ②檢測HCD基因是否成功表達(dá)出真菌細(xì)胞壁降解酶(HCD)的方法技術(shù)是
     
    。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:8引用:1難度:0.6
  • 2.下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)和運用的敘述錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/31 18:30:2組卷:19引用:3難度:0.9
  • 3.觀察真菌細(xì)胞內(nèi)有關(guān)代謝過程圖,選出提高氨基酸B產(chǎn)量的最佳措施(  )
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    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:4引用:1難度:0.7
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