為了獲得抗蚜蟲棉花新品種,研究人員將雪花蓮凝集素基因(GNA)和尾穗莧凝集素基因(ACA)通過一定方法形成GNA-ACA融合基因,并將該融合基因與載體(pBⅠ121)結(jié)合獲得重組載體,如圖所示,然后導(dǎo)入棉花細(xì)胞。圖中KpnⅠ、BsaBⅠ、XhoⅠ為不同限制酶。分析并回答下列問題:
(1)據(jù)圖分析,為獲得GNA-ACA融合基因,可使用限制酶 BsaBⅠBsaBⅠ和DNA連接酶處理基因GNA和ACA。
(2)圖中把GNA-ACA融合基因重組到質(zhì)粒的過程是基因工程的核心步驟,即 基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體的構(gòu)建,其目的是 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá)和發(fā)揮作用,并且可以遺傳給下一代使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá)和發(fā)揮作用,并且可以遺傳給下一代,構(gòu)建的該結(jié)構(gòu)除了圖中載體(pBⅠ121)所含有的結(jié)構(gòu)外,還應(yīng)包括 終止子、目的基因、復(fù)制原點(diǎn)終止子、目的基因、復(fù)制原點(diǎn)(答出三點(diǎn))等結(jié)構(gòu)。
(3)檢測(cè)上述GNA-ACA融合基因?qū)朊藁?xì)胞后是否表達(dá)出相應(yīng)產(chǎn)物,從分子水平上,可以采用的檢測(cè)方法是 抗原—抗體雜交法抗原—抗體雜交法。
(4)成功獲取含GNA-ACA融合基因的棉花細(xì)胞后,可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲取轉(zhuǎn)基因棉花植株,其依據(jù)的原理是 植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性,將含有GNA-ACA融合基因的棉花細(xì)胞培養(yǎng)成一株完整植株的基本程序是 含GNA—ACA融合基因的棉花細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化長出芽和根,進(jìn)而發(fā)育為完整的轉(zhuǎn)基因棉花植株含GNA—ACA融合基因的棉花細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化長出芽和根,進(jìn)而發(fā)育為完整的轉(zhuǎn)基因棉花植株(用流程圖表示)。
脫分化
再分化
脫分化
再分化
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;植物的組織培養(yǎng).
【答案】BsaBⅠ;基因表達(dá)載體;使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá)和發(fā)揮作用,并且可以遺傳給下一代;終止子、目的基因、復(fù)制原點(diǎn);抗原—抗體雜交法;植物細(xì)胞的全能性;含GNA—ACA融合基因的棉花細(xì)胞愈傷組織長出芽和根,進(jìn)而發(fā)育為完整的轉(zhuǎn)基因棉花植株
脫分化
再分化
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:3難度:0.4
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