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為了獲得抗蚜蟲棉花新品種,研究人員將雪花蓮凝集素基因(GNA)和尾穗莧凝集素基因(ACA)通過一定方法形成GNA-ACA融合基因,并將該融合基因與載體(pBⅠ121)結合獲得重組載體,如圖所示,然后導入棉花細胞。圖中KpnⅠ、BsaBⅠ、XhoⅠ為不同限制酶。分析并回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)據(jù)圖分析,為獲得GNA-ACA融合基因,可使用限制酶
BsaBⅠ
BsaBⅠ
和DNA連接酶處理基因GNA和ACA。
(2)圖中把GNA-ACA融合基因重組到質粒的過程是基因工程的核心步驟,即
基因表達載體
基因表達載體
的構建,其目的是
使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并表達和發(fā)揮作用,并且可以遺傳給下一代
使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并表達和發(fā)揮作用,并且可以遺傳給下一代
,構建的該結構除了圖中載體(pBⅠ121)所含有的結構外,還應包括
終止子、目的基因、復制原點
終止子、目的基因、復制原點
(答出三點)等結構。
(3)檢測上述GNA-ACA融合基因導入棉花細胞后是否表達出相應產(chǎn)物,從分子水平上,可以采用的檢測方法是
抗原—抗體雜交法
抗原—抗體雜交法

(4)成功獲取含GNA-ACA融合基因的棉花細胞后,可通過植物組織培養(yǎng)技術獲取轉基因棉花植株,其依據(jù)的原理是
植物細胞的全能性
植物細胞的全能性
,將含有GNA-ACA融合基因的棉花細胞培養(yǎng)成一株完整植株的基本程序是
含GNA—ACA融合基因的棉花細胞
脫分化
愈傷組織
再分化
長出芽和根,進而發(fā)育為完整的轉基因棉花植株
含GNA—ACA融合基因的棉花細胞
脫分化
愈傷組織
再分化
長出芽和根,進而發(fā)育為完整的轉基因棉花植株
(用流程圖表示)。

【答案】BsaBⅠ;基因表達載體;使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并表達和發(fā)揮作用,并且可以遺傳給下一代;終止子、目的基因、復制原點;抗原—抗體雜交法;植物細胞的全能性;含GNA—ACA融合基因的棉花細胞
脫分化
愈傷組織
再分化
長出芽和根,進而發(fā)育為完整的轉基因棉花植株
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:3難度:0.4
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  • 菁優(yōu)網(wǎng)1.圖示PIJ702是一種常用質粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?;卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長;-表示不生長。
    (1)限制性核酸內切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換,構建重組質粒pZHZ8。上述兩種質粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     

    (3)導入目的基因時,首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞,再將重組質粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    (4)不含質粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導入pZHZ8的鏈霉菌細胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應在
     
    μg/mL以上,挑選成功導入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測受體細胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測方法應采用
     
    技術。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21引用:3難度:0.6
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    發(fā)布:2024/11/7 8:0:2組卷:5引用:1難度:0.5
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