藍舌病是由藍舌病病毒（BTV）引起的感染牛、羊等家畜的烈性傳染病。BTV病毒的核酸由雙鏈RNA構(gòu)成，可編碼7種結(jié)構(gòu)蛋白和5種非結(jié)構(gòu)蛋白（只在被感染的細胞中表達）。研究人員將編碼病毒的這些蛋白基因?qū)雸D1所示pUC18質(zhì)粒中，用于制備相關(guān)疫苗的研究。請據(jù)圖和所學知識回答問題：
注：圖1為pUC18質(zhì)粒（2.7kb），圖2為質(zhì)粒B（2.7kb），EcoRⅠ（0.6kb）、PvuⅠ（0.8kb）為限制酶及其切割位點與復制原點之間的距離。已知1kb=1000個堿基對。
（1）pUC18質(zhì)粒為環(huán)狀DNA分子，為了能成功構(gòu)建重組DNA分子，需要先通過 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄的方法獲得目的基因，再用 PCRPCR技術(shù)擴增。在建立基因文庫的過程中須將含有目的基因的質(zhì)粒導入 受體菌受體菌中儲存。
（2）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達載體構(gòu)建基因表達載體。將圖1的目的基因和圖2所示質(zhì)粒連接后，得到圖3中三種方式。為選出正向連接的重組質(zhì)粒，使用限制酶 EcoRⅠEcoRⅠ對重組質(zhì)粒完全酶切后進行電泳分析，若是正向連接載體，結(jié)果會出現(xiàn)長度為 1.21.2Kb和 5.55.5Kb兩種DNA分子。
（3）重組病毒載體疫苗是以減毒病毒為載體，將抗原蛋白基因?qū)雱游锛毎⒈磉_，進而引發(fā)免疫反應(yīng)。研究人員在制備BTV重組病毒載體疫苗時不選用編碼 非結(jié)構(gòu)蛋白非結(jié)構(gòu)蛋白（結(jié)構(gòu)蛋白/非結(jié)構(gòu)蛋白）的基因作抗原基因，理由是 這些病毒蛋白僅存在于被感染的細胞中，不存在于病毒顆粒中這些病毒蛋白僅存在于被感染的細胞中，不存在于病毒顆粒中。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；PCR；受體菌；構(gòu)建基因表達載體；EcoRⅠ；1.2；5.5；非結(jié)構(gòu)蛋白；這些病毒蛋白僅存在于被感染的細胞中，不存在于病毒顆粒中
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：13引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6