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EPO是促紅細胞生成素的英文簡稱，是一種激素樣物質(zhì)，可促進體內(nèi)新紅細胞生成。人類已可通過基因工程合成EPO基因，并采用中國倉鼠卵巢（CHO）細胞表達系統(tǒng)來獲取產(chǎn)物，其過程如圖。請回答下列問題：
菁優(yōu)網(wǎng)
（1）從人體組織中提取EPO的mRNA，在
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶的作用下合成EPO基因的cDNA，再通過PCR技術(shù)獲得大量EPO基因，PCR的產(chǎn)物一般通過
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
來鑒定。進行擴增時需先加熱至90?95℃，后冷卻至55?60℃，以上調(diào)控溫度操作的目的分別是
使DNA雙鏈打開解為單鏈
使DNA雙鏈打開解為單鏈
、
使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合
使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合
。
（2）供體母鼠通常情況下每次排卵8?12枚，為使其超數(shù)排卵，需注射
促性腺
促性腺
 激素以排出更多的卵子，培養(yǎng)到
MⅡ中
MⅡ中
 期與獲能的精子相遇，精子穿越透明帶，完成體外受精。
（3）①過程構(gòu)建了基因表達載體，內(nèi)部包括不可缺少的組成部分，其中
啟動子
啟動子
 能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。切割含EPO基因的DNA與載體時通常用兩種不同限制酶的原因是
防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接
防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接
。
（4）采用
顯微注射
顯微注射
 技術(shù)，將重組表達載體導(dǎo)入小鼠受精卵中，將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。當(dāng)胚胎發(fā)育至
桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
 時期，向受體移植。
（5）若想檢驗轉(zhuǎn)基因倉鼠是否成功表達EPO，可以采用
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
 技術(shù)對血液來進行檢測。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄；瓊脂糖凝膠電泳；使DNA雙鏈打開解為單鏈；使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合；促性腺；MⅡ中；啟動子；防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接；顯微注射；桑葚胚或囊胚；抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/8 8:0:9組卷：89引用：1難度：0.6
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  • 1．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達載體，并將其導(dǎo)入鹽藻細胞中，進行了一系列實驗。回答下列問題：
    （1）研究人員利用PCR技術(shù)特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了
     
    。
    （2）獲取目的基因后，為了構(gòu)建基因表達載體，還需要使用的酶是
     
    （答出2種）。構(gòu)建成功的基因表達載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    （答出3種）等結(jié)構(gòu)。
    （3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細胞后進行了檢測，相關(guān)步驟和實驗結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析，該實驗結(jié)果說明
     
    。
    組別 實驗步驟 實驗結(jié)果
    ① ② ③
    轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組） 離心收集三組細
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品    		 將TI注射到大白
    兔體內(nèi)，獲取TI
    抗體    		 讓TI抗體和樣品
    進行混合檢測    		 有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組） 無雜交帶
    陽性對照組（C組） 有雜交帶

    發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

  • 菁優(yōu)網(wǎng)2．圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tar為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?；卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL） 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長；-表示不生長。
    （1）限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂，切割形成的末端有
     
    兩種。
    （2）以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    （3）導(dǎo)入目的基因時，首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    （4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上，挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，第一步需檢測受體細胞的
     
    （填“DNA”或“RNA”），檢測方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

  • 3．我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，下列說法錯誤的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7
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