用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中需要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點如圖所示。

回答下列問題：
（1）常用的DNA鏈接酶有E.coli DNA連接酶和T₄DNA連接酶。如圖中
EcoRⅠ、PstⅠ
EcoRⅠ、PstⅠ
酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA連接酶連接。如圖中
EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ
EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ
酶切割后的DNA片段可以用T₄DNA連接酶連接。
（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
。
（3）DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點，可以保證質(zhì)粒在受體細胞中能
自我復(fù)制、穩(wěn)定存在
自我復(fù)制、穩(wěn)定存在
；質(zhì)粒DNA分子上有
一個至多個限制酶切點
一個至多個限制酶切點
便于外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標記基因（如某種抗生素抗性基因）。利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細胞，方法是
用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細胞
用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細胞
。
（4）表達載體含有啟動子，啟動子是指
轉(zhuǎn)錄開始的地方，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點
轉(zhuǎn)錄開始的地方，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點
。

【答案】EcoRⅠ、PstⅠ；EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ；磷酸二酯鍵；自我復(fù)制、穩(wěn)定存在；一個至多個限制酶切點；用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細胞；轉(zhuǎn)錄開始的地方，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點

【解答】

【點評】

聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。

發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：600引用：7難度：0.6

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1．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達載體，并將其導(dǎo)入鹽藻細胞中，進行了一系列實驗。回答下列問題：
（1）研究人員利用PCR技術(shù)特異性地擴增目的基因的前提是需要

，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了

。
（2）獲取目的基因后，為了構(gòu)建基因表達載體，還需要使用的酶是

（答出2種）。構(gòu)建成功的基因表達載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、

（答出3種）等結(jié)構(gòu)。
（3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細胞后進行了檢測，相關(guān)步驟和實驗結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是

。據(jù)表分析，該實驗結(jié)果說明

。

組別實驗步驟實驗結(jié)果

① ② ③

轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組）離心收集三組細
胞制備可溶性蛋
白質(zhì)樣品將TI注射到大白
兔體內(nèi)，獲取TI
抗體讓TI抗體和樣品
進行混合檢測有雜交帶

非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組）無雜交帶

陽性對照組（C組）有雜交帶

發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

A．科學(xué)家已對Bt基因的序列信息、表達產(chǎn)物等有了較為深入的了解

B．篩選Bt基因后可以利用PCR技術(shù)對其進行大量的擴增

C．培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的核心工作是將Bt基因?qū)朊藁毎?/label>

D．檢查轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否培育成功首先要進行分子水平的檢測

發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7

A．DNA連接酶的作用是將兩個黏性末端的堿基連接起來

B．目的基因?qū)胧荏w細胞后，受體細胞即發(fā)生基因突變

C．目的基因與運載體結(jié)合的過程發(fā)生在細胞外

D．常使用的運載體有大腸桿菌、噬菌體和動植物病毒等

發(fā)布：2024/11/3 12:0:2組卷：3引用：1難度：0.7

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