用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中需要使用多種工具酶,其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點如圖所示。
回答下列問題:
(1)常用的DNA鏈接酶有E.coli DNA連接酶和T4DNA連接酶。如圖中 EcoRⅠ、PstⅠEcoRⅠ、PstⅠ酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA連接酶連接。如圖中 EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤEcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。
(2)DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
(3)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征,如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點,可以保證質(zhì)粒在受體細胞中能 自我復(fù)制、穩(wěn)定存在自我復(fù)制、穩(wěn)定存在;質(zhì)粒DNA分子上有 一個至多個限制酶切點一個至多個限制酶切點便于外源DNA插入;質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因(如某種抗生素抗性基因)。利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細胞,方法是 用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細胞用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細胞。
(4)表達載體含有啟動子,啟動子是指 轉(zhuǎn)錄開始的地方,RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點轉(zhuǎn)錄開始的地方,RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】EcoRⅠ、PstⅠ;EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ;磷酸二酯鍵;自我復(fù)制、穩(wěn)定存在;一個至多個限制酶切點;用含該抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)宿主細胞;轉(zhuǎn)錄開始的地方,RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點
【解答】
【點評】
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