利用基因工程和胚胎工程等技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因奶牛的流程如圖所示，該轉(zhuǎn)基因奶牛分泌的乳汁內(nèi)含有某種藥用蛋白。據(jù)圖分析并回答下列問(wèn)題。

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶，箭頭指向的位置為限制酶的切割位置：Amp^r是氨芐青霉素抗性基因，Neo^r是G418抗性基因。
（1）①②過(guò)程需要用到的工具酶是

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

；③過(guò)程采用的方法是

顯微注射法

顯微注射法

。
（2）重組質(zhì)粒上的抗生素抗性基因有利于篩選出含有目的基因的細(xì)胞。G418不能有效殺死受體細(xì)胞。而一定濃度的氨芐青霉素能有效殺死不具有Amp^r的受體細(xì)胞，結(jié)合該圖推測(cè)，過(guò)程①選用的兩種限制酶是

Ⅲ和Ⅳ

Ⅲ和Ⅳ

（選填圖中的編號(hào)），該圖的受精卵應(yīng)在添加

氨芐青霉素

氨芐青霉素

（填“氨芐青霉素”或“G418”）的培養(yǎng)液中篩選。
（3）采集卵母細(xì)胞時(shí)，可用

促性腺

促性腺

激素處理良種母牛，使其排出更多的卵母細(xì)胞；進(jìn)行過(guò)程⑥前要對(duì)采集到的精子進(jìn)行獲能處理，方法是將其放在

一定濃度的肝素或鈣離子載體

一定濃度的肝素或鈣離子載體

溶液中進(jìn)行誘導(dǎo)。
（4）經(jīng)過(guò)篩選后的受精卵中不能檢測(cè)到該藥用蛋白，

不能

不能

（填能或不能）作為目的基因未導(dǎo)入受精卵染色體的依據(jù)，理由是

該藥用蛋白基因只能在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)

該藥用蛋白基因只能在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)

。