生物工程。研究人員發(fā)現(xiàn),有一種稱作XRCC2的啟動子(負責RNA聚合酶識別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列)在正常細胞中表達水平很低,而在癌細胞卻高表達。利用該特性,研究人員結(jié)合DTA(白喉毒素A基因,其表達產(chǎn)物能夠殺死細胞)做了如圖1實驗。
(1)獲取XRCC2啟動子的方法是 化學方法人工合成化學方法人工合成,該方法的意義是 獲得大量目的基因獲得大量目的基因。
(2)為了成功構(gòu)建能夠特異性殺死腫瘤細胞的質(zhì)粒,需要先將XRCC2啟動子與DTA形成融合基因。首先用限制酶 NheI、AgeINheI、AgeI切割XRCC2啟動子,用限制酶 AgeI、XbaIAgeI、XbaI切割DTA基因,然后用DNA連接酶將它們連接形成融合基因。為了提高融合基因與質(zhì)粒的重組效率,應(yīng)采取的措施為 提高融合基因的量提高融合基因的量。
(3)此實驗中涉及的生物技術(shù)有 CDCD(多選)。
A.細胞融合 B.細胞核移植 C.轉(zhuǎn)基因技術(shù) D.動物細胞培養(yǎng)
(4)你認為步驟5中需要的條件有 BCDEFBCDEF(多選)。
A.CO2充足 B.適宜的O2濃度 C.pH適中 D.無菌操作 E.豐富的營養(yǎng)物質(zhì) F.35-37度溫度
(5)實驗者分別通過電轉(zhuǎn)染法將0、0.05ug、0.1ug的重組質(zhì)粒導(dǎo)入不同腫瘤細胞中,結(jié)果如圖2,請分析該實驗結(jié)果能否說明質(zhì)粒XRCC2-DTA能夠特異性的殺死腫瘤細胞,若不能,實驗應(yīng)做哪些改進措施?不能,應(yīng)增添正常細胞株,將不同量的重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中,和腫瘤細胞對比觀察細胞增殖情況不能,應(yīng)增添正常細胞株,將不同量的重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中,和腫瘤細胞對比觀察細胞增殖情況。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】化學方法人工合成;獲得大量目的基因;NheI、AgeI;AgeI、XbaI;提高融合基因的量;CD;BCDEF;不能,應(yīng)增添正常細胞株,將不同量的重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中,和腫瘤細胞對比觀察細胞增殖情況
【解答】
【點評】
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