為使甘藍具有抗除草劑能力，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉入甘藍植株，獲得抗草甘膦轉基因甘藍。
（1）草甘膦抗性基因一條鏈的兩端序列如圖2，采用PCR技術獲取和擴增草甘膦抗性基因，應選用的引物組合為 AA。
A．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TCTGTTGAAT-3′
B．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TAAGTTGTCT-3′
C．5′-ATTCAACAGA-3′和5′-ATCATCCAAG-3′
D．5′-ATTCAACAGA-3′和5′-GAACCTACTA-3′
（2）基因工程中最核心的步驟是 ①①（填數(shù)字編號），其目的是 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。
（3）步驟②用 Ca2+Ca2+處理農桿菌后獲得感受態(tài)細胞，以便將重組質粒導入。步驟③將農桿菌與甘藍愈傷組織共培養(yǎng)后，在步驟④的培養(yǎng)基中添加 潮霉素潮霉素以便篩選出含目的基因的甘藍植株。
（4）若目的基因用BamHⅠ和BglⅡ剪切，質粒用BamHⅠ剪切，酶切后的目的基因存在正向與反向兩種連接方式，可用 BamHI和EcoRIBamHI和EcoRI酶對兩種重組質粒進行剪切，通過凝膠電泳分析產(chǎn)物大小進行區(qū)分，如圖3所示，圖中 樣品2樣品2（樣品1/樣品2）為所需基因表達載體。
| 限制酶 | 識別序列和切割位點 |
| BamHⅠ | -G′GATCC- |
| BglⅡ | -A′GATCT- |
| EcoRⅠ | -G′AATTC- |
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】A；①；使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用；Ca2+；潮霉素；BamHI和EcoRI；樣品2
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/22 8:0:8組卷：9引用：2難度：0.5
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6