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二十碳五烯酸（EPA）能促進體內(nèi)飽和脂肪酸代謝，是人體自身不能直接從頭合成但又不可缺少的營作物質(zhì)。獲取EPA產(chǎn)品的主要途徑是從魚油等海洋漁業(yè)資源中提取。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)從海洋細菌中提取了EPA合成途徑的關鍵基因pfaB，并將其導入酵母菌內(nèi)，通過酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)EPA，相關過程如圖所示，請回答下列問題：
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（1）利用PCR擴增pfaB基因前，需設計引物
①④
①④
（填序號），在第
三
三
輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段（pfaB基因）。
（2）利用PCR擴增pfaB基因時，需將溫度上升到90℃后再降溫至50℃，其目的是
使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后，便于引物與模板鏈通過堿基互補配對原則結(jié)合
使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后，便于引物與模板鏈通過堿基互補配對原則結(jié)合
。將pfaB基因連接在pPIC9質(zhì)粒上時所用的酶是
DNA連接酶（和限制酶）
DNA連接酶（和限制酶）
。
（3）將pfaB-pPIC9表達載體導入酵母菌前，需先將表達載體導入大腸桿菌并進行篩選，篩選時培養(yǎng)基中應加入
氨芐青霉素
氨芐青霉素
，再將含有表達載體的大腸桿菌與酵母菌置于電轉(zhuǎn)杯中，通過電激將大腸桿菌導入酵母菌，該表達載體在酵母菌中不會隨著酵母菌繁殖而丟失的原因是
表達載體上含有真核生物復制原點，能在酵母菌中復制
表達載體上含有真核生物復制原點，能在酵母菌中復制
。

【答案】①④；三；使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后，便于引物與模板鏈通過堿基互補配對原則結(jié)合；DNA連接酶（和限制酶）；氨芐青霉素；表達載體上含有真核生物復制原點，能在酵母菌中復制
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：23引用：2難度：0.6
相似題

  • 1．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
    （1）在進行基因工程操作時，先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是
     
    。
    （2）若要使目的基因在受體細胞中表達，需要構(gòu)建基因表達載體，其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外，還包括
     
    、
     
    、
     
    ，其中
     
    與目的基因的轉(zhuǎn)錄開始有關。
    （3）當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     
    。
    （4）如何從個體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無抗真菌病的能力？
     
    。
    （5）若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株，但植株抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布：2024/10/31 8:0:1組卷：4引用：1難度：0.7

  • 2．油菜是世界上重要的油料作物，其生長期常受到病蟲害的危害，其中80%是由病原真菌引起。過去對油菜真菌病害的控制主要使用化學殺菌劑；真菌的細胞壁由幾丁質(zhì)組成，現(xiàn)利用外源幾丁質(zhì)酶基因（如圖1）注入油菜（本身無幾丁質(zhì)酶基因）中從而提高油菜的抗真菌能力，該過程利用了限制性核酸內(nèi)切酶（如圖2）。請回答下列問題：
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    （1）據(jù)圖2寫出酶BamHI酶切后形成的DNA片段的末端序列：
     
    。形成重組DNA分子時，含幾丁質(zhì)酶基因的DNA片段可能自身
     
    。
    （2）將重組DNA導入油菜細胞的常用方法是
     
    。為了檢測油菜細胞是否成功導入幾丁質(zhì)酶基因，可利用
     
    制成的探針進行檢測。
    （3）將轉(zhuǎn)基因油菜細胞培養(yǎng)成幼苗，過程中需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中
     
    的配比，幼苗可置于有
     
    的環(huán)境中，檢測幾丁質(zhì)酶基因是否成功表達。
    （4）采用化學殺蟲劑在消滅真菌病害的同時，也污染了
     
    （至少2種）等無機環(huán)境，更為重要的是使得
     
    迅速減少。

    發(fā)布：2024/10/31 8:0:1組卷：3引用：1難度：0.7

  • 3．已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-，根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/10/31 13:0:2組卷：46引用：2難度：0.7
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