科研人員培育了一種能夠降解餐廚廢棄物并生成乳酸的轉(zhuǎn)基因畢赤酵母?；舅悸肥窃谌樗崦摎涿富颍↙DH）的單基因表達載體中逐個接入糖化酶基因（Ga）表達盒與α-淀粉酶基因（Amy）表達盒，構(gòu)建出AGL—三基因表達載體，如圖1所示。
（1）利用PCR技術(shù)獲得目的基因的過程中，需要在PCR反應(yīng)體系中加入模板、Taq酶及 引物和四種游離的脫氧核苷酸引物和四種游離的脫氧核苷酸。
（2）將圖1所示結(jié)構(gòu)“導(dǎo)入”畢赤酵母后，將畢赤酵母轉(zhuǎn)移至含 博來霉素博來霉素的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，篩選出能夠生存的菌落。
（3）對篩選出的菌株進行個體水平鑒定的方法是 將其接種至餐廚廢棄物中，定時測定乳酸的含量將其接種至餐廚廢棄物中，定時測定乳酸的含量，利用轉(zhuǎn)基因畢赤酵母降解餐廚廢棄物生成乳酸，優(yōu)點有 既減少了環(huán)境污染，也降低了乳酸的生產(chǎn)成本既減少了環(huán)境污染，也降低了乳酸的生產(chǎn)成本。
（4）構(gòu)建三基因表達載體的難點在于構(gòu)建目的基因的表達盒，圖2為Amy表達盒的構(gòu)建過程。（pro為啟動子；AOX TT為終止子；Bsp119Ⅰ、XbaⅠ、BglⅡ、BamHⅠ為不同限制酶，①②為操作過程。）操作①的處理是 將質(zhì)粒1與α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ與XbaⅠ兩種限制酶處理將質(zhì)粒1與α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ與XbaⅠ兩種限制酶處理，然后用DNA連接酶拼接。在此之前，科研人員還利用點突變技術(shù)對α-淀粉酶基因序列進行了同義密碼子替換（即不影響氨基酸序列）改造，推測其原因是 α-淀粉酶基因序列中含有所用限制酶的識別序列α-淀粉酶基因序列中含有所用限制酶的識別序列。操作②中必需用 BglⅡ、BamHⅠBglⅡ、BamHⅠ酶對質(zhì)粒2處理，才能獲得能正常表達的α-淀粉酶基因表達盒。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】引物和四種游離的脫氧核苷酸；博來霉素；將其接種至餐廚廢棄物中，定時測定乳酸的含量；既減少了環(huán)境污染，也降低了乳酸的生產(chǎn)成本；將質(zhì)粒1與α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ與XbaⅠ兩種限制酶處理；α-淀粉酶基因序列中含有所用限制酶的識別序列；BglⅡ、BamHⅠ
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/10 8:0:9組卷：23引用：3難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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