蘇云金芽孢桿菌中含有一種抗蟲基因（Bt基因），通過產(chǎn)生蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體蛋白（Bt抗蟲蛋白），破壞鱗翅目昆蟲的消化系統(tǒng)來殺死棉鈴蟲?？茖W(xué)家將該細(xì)菌的“殺蟲基因”轉(zhuǎn)移到棉花里，培育出了抗蟲棉，讓棉花也能產(chǎn)生Bt抗蟲蛋白抵抗蟲害。如圖中箭頭處為EcoRⅠ或BamHⅠ限制酶的酶切位點(diǎn)，回答下列問題：

（1）基因工程中把Bt基因稱為

目的基因

目的基因

，可利用PCR技術(shù)獲取并擴(kuò)增B基因，前提是要有一段已知的Bt基因的核苷酸序列，這是因?yàn)?

利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因需要兩種引物，合成引物的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列

利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因需要兩種引物，合成引物的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列

。
（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可將Bt基因連接到質(zhì)粒的T-DNA序列中，這樣做的意義是

T-DNA序列可將目的基因整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA上

T-DNA序列可將目的基因整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA上

。
（3）實(shí)際操作中，一般采用EcoRⅠ和BamHⅠ兩種酶進(jìn)行切割。與只采用EcoRⅠ酶切割相比，用兩種酶切割的優(yōu)勢(shì)：一是避免

目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化

目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化

，二是避免

造成反向連接

造成反向連接

。
（4）檢測(cè)到Bt基因?qū)胨拗骷?xì)胞后還要檢測(cè)目的基因是否表達(dá)Bt毒蛋白，常用的方法是

抗原─抗體雜交

抗原─抗體雜交

，轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功還要對(duì)棉花進(jìn)行

抗蟲接種

抗蟲接種

檢驗(yàn)。