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試題詳情
如圖是利用基因工程方法生產重組人生長激素的有關資料.圖中質粒表示基因工程中經常選用的載體--pBR322質粒,Amp表示青霉素抗性基因,Tet表示四環(huán)素抗性基因.根據如圖回答下列問題(限制酶Pst,1、EcoR1和HindⅢ切割形成的末端均不相同);

(1)過程②需要(逆)反轉錄(逆)反轉錄酶,得到的cDNA一般比從基因組文庫中獲得的目的基因要小的多,原因是不含內含子不含內含子.過程④需要DNA連接DNA連接酶,過程⑤中要提高成功率,常用Ca2+(或CaCl2溶液)Ca2+(或CaCl2溶液)處理大腸桿菌.
(2)如果用限制酶Pst、EcoRⅠ和HindⅢ對質粒-pBR322進行切割,用一種酶、兩種酶和三種酶分別切割時,則形成的DNA片段共99種.
(3)基因表達載體除了目的基因和抗性基因外,至少還有啟動子、復制原點、終止子啟動子、復制原點、終止子等(至少答兩個).
(4)如果只用限制酶PstI切割目的基因和質粒pBR322,完成過程④⑤后,將三角瓶內的大腸桿菌(不含Amp′、Tet′抗性質粒)先接種到甲培養(yǎng)基上,形成菌落后用無菌牙簽挑取甲上的單個菌落,分別接種到乙和丙兩個培養(yǎng)基的相同位置上,一段時間后,菌落的生長狀況如圖所示.接種到甲培養(yǎng)基上的目的是篩選含四環(huán)素抗性基因含四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌,含有目的基因的大腸桿菌在乙、丙培養(yǎng)基上的存活狀態(tài)是在乙中不能存活在乙中不能存活、在丙中存活在丙中存活,也可以用DNA分子雜交DNA分子雜交方法進行檢測.
(5)酵母菌細胞也常常作為基因工程的受體細胞,與大腸桿菌等細胞相比,其優(yōu)點是在蛋白質合成后,細胞可以對其進行加工(或修飾 )加工(或修飾 )并分泌到細胞外,便于提?。?/h1>
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】(逆)反轉錄;不含內含子;DNA連接;Ca2+(或CaCl2溶液);9;啟動子、復制原點、終止子;含四環(huán)素抗性基因;在乙中不能存活;在丙中存活;DNA分子雜交;加工(或修飾 )
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/12/12 8:0:1組卷:6難度:0.5
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