稻瘟病是水稻最重要的病害之一,為達到防治目的,科研人員通過轉基因技術培育出了抗稻瘟病水稻品種。回答下列問題:
(1)通過RT-PCR技術以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴增出cDNA.在PCR過程中,兩個引物是熱穩(wěn)定DNA聚合酶熱穩(wěn)定DNA聚合酶酶的結合位點;用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進行分子雜交,可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū),其原因是DNA分子含有內含子、非編碼區(qū)等序列,mRNA分子中沒有相應互補的堿基序列DNA分子含有內含子、非編碼區(qū)等序列,mRNA分子中沒有相應互補的堿基序列。
(2)利用RT-PCR技術擴增基因時,設計兩種引物的堿基序列的主要依據是X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列,為了便于擴增后的X基因與質粒連接,常在兩條引物上設計加入不同的限制酶酶切位點,主要目的是使X基因能定向插入表達載體,減少自連使X基因能定向插入表達載體,減少自連。
(3)基因工程中,將重組質粒導入植物細胞采用最多的方法是農桿菌轉化法農桿菌轉化法,導入動物受精卵采用的方法是顯微注射法顯微注射法。
(4)若要檢測抗稻瘟病基因是否翻譯出相應蛋白質,可采用的分子水平的檢測方法是抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】熱穩(wěn)定DNA聚合酶;DNA分子含有內含子、非編碼區(qū)等序列,mRNA分子中沒有相應互補的堿基序列;X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列;使X基因能定向插入表達載體,減少自連;農桿菌轉化法;顯微注射法;抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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