新冠病毒是RNA病毒,病毒的s蛋白(刺突蛋白)是決定病毒入侵易感細胞的關(guān)鍵蛋白,可與宿主細胞的蛩體結(jié)合。如表為兩種針對新冠病毒的疫苗研發(fā)方法以及抗S蛋白單克隆抗體制備過程?;卮鹣铝袉栴}。
方法 |
技術(shù)路線 |
基因工程疫苗 |
S蛋白基因→基因表達載體→大腸桿菌→S蛋白→人體 |
腺病毒載體重組疫苗 |
S蛋白基因→腺病毒基因表達載體→人體 |
(1)在制備疫苗的過程中,常采用
聚合酶鏈式反應
聚合酶鏈式反應
(中文全稱)技術(shù)獲取和擴增新冠病毒的S蛋白基因。擴增時,除了緩沖溶液、模板、四種脫氧核苷酸,還需要加入引物和
耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)
耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)
。其產(chǎn)物一般通過
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
來鑒定。
(2)引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的
短單鏈核酸
短單鏈核酸
。
(3)腺病毒載體重組疫苗是將S蛋白基因重組到改造后的腺病毒內(nèi),改造后的腺病毒載體應具備的條件包括對宿主細胞無害、能夠在宿主細胞中自我復制、具有標記基因和
具有(一至多個)限制酶切割位點
具有(一至多個)限制酶切割位點
。其中標記基因的作用是
便于重組DNA分子的篩選
便于重組DNA分子的篩選
。