我國是世界產(chǎn)棉大國，棉花產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的1/4。但是棉花病蟲害非常多，尤其是蟲害，直接影響了棉花的產(chǎn)量。轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的研發(fā)成功，為棉花的增收做出了巨大的貢獻。回答下列問題：
（1）轉(zhuǎn)基因抗蟲棉所需的殺蟲基因，可用PCR技術(shù)大量擴增。擴增過程中需要將溫度冷卻至55～60℃，目的是 降溫使兩種引物通過堿基互補配對原則與兩條單鏈DNA結(jié)合降溫使兩種引物通過堿基互補配對原則與兩條單鏈DNA結(jié)合。獲得大量殺蟲基因后，還需利用兩種酶構(gòu)建基因表達載體。為了使殺蟲基因和質(zhì)粒能正確地成功拼接，一般操作方法是 準備兩種不同的限制酶，對殺蟲基因所在DNA片段和質(zhì)粒均進行雙酶切，再使用DNA連接酶將殺蟲基因和質(zhì)粒連接起來準備兩種不同的限制酶，對殺蟲基因所在DNA片段和質(zhì)粒均進行雙酶切，再使用DNA連接酶將殺蟲基因和質(zhì)粒連接起來。
（2）將殺蟲基因?qū)朊藁毎卸喾N方法，我國獨創(chuàng)的方法是 花粉管通道法花粉管通道法，另外還可以利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法讓另殺蟲基因的遺傳特性在棉花細胞里得以穩(wěn)定維持和表達，理由是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法使Ti質(zhì)粒上插入了殺蟲基因的的T-DNA整合到棉花細胞的染色體DNA上農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法使Ti質(zhì)粒上插入了殺蟲基因的的T-DNA整合到棉花細胞的染色體DNA上。
（3）殺蟲基因?qū)朊藁毎?，可利用放射性同位素標記的目的基因的DNA片段作為 基因探針基因探針，目的是檢測 目的基因是否成功導入受體細胞目的基因是否成功導入受體細胞。若是利用抗原一抗體雜交技術(shù)，結(jié)果顯示出雜交帶，則說明 殺蟲基因在棉花細胞中成功表達出對應蛋白質(zhì)殺蟲基因在棉花細胞中成功表達出對應蛋白質(zhì)。
（4）除了上述的分子檢測外，有時還需要進行個體生物學水平的鑒定。簡述在個體水平鑒定殺蟲基因是否成功表達的實驗思路：讓害蟲分別吞食轉(zhuǎn)基因棉花和普通棉花的葉片，觀察害蟲的存活情況，如果普通棉花組害蟲存活，轉(zhuǎn)基因棉花組害蟲死亡，則說明殺蟲基因成功表達，若轉(zhuǎn)基因棉花組害蟲不死亡，則說明殺蟲基因沒有成功表達讓害蟲分別吞食轉(zhuǎn)基因棉花和普通棉花的葉片，觀察害蟲的存活情況，如果普通棉花組害蟲存活，轉(zhuǎn)基因棉花組害蟲死亡，則說明殺蟲基因成功表達，若轉(zhuǎn)基因棉花組害蟲不死亡，則說明殺蟲基因沒有成功表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】降溫使兩種引物通過堿基互補配對原則與兩條單鏈DNA結(jié)合；準備兩種不同的限制酶，對殺蟲基因所在DNA片段和質(zhì)粒均進行雙酶切，再使用DNA連接酶將殺蟲基因和質(zhì)粒連接起來；花粉管通道法；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法使Ti質(zhì)粒上插入了殺蟲基因的的T-DNA整合到棉花細胞的染色體DNA上；基因探針；目的基因是否成功導入受體細胞；殺蟲基因在棉花細胞中成功表達出對應蛋白質(zhì)；讓害蟲分別吞食轉(zhuǎn)基因棉花和普通棉花的葉片，觀察害蟲的存活情況，如果普通棉花組害蟲存活，轉(zhuǎn)基因棉花組害蟲死亡，則說明殺蟲基因成功表達，若轉(zhuǎn)基因棉花組害蟲不死亡，則說明殺蟲基因沒有成功表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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