雙脫氧終止法對DNA進行測序的原理如圖，在4個試管中分別加入4種脫氧核苷三磷酸（dNTP）和1種雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）；ddNTP可以與dNTP競爭核苷酸鏈延長位點，并終止DNA片段的延伸。在4個試管中DNA鏈將會分別在A、C、C及T位置終止，并形成不同長度的DNA片段。這些片段會隨電泳分開并顯示出來。下列說法不正確的是（　?。?/h1>

A．由電泳結果可知單鏈未知序列中應含4個胞嘧啶

B．待測單鏈未知序列的四種堿基中G、C的數量相同

C．待測單鏈未知序列的5'端是鳥嘌呤脫氧核苷酸

D．dNTP、ddNTP水解兩個高能磷酸鍵可能為測序供能

【答案】B；C

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：36難度：0.6

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1．雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結構如圖所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止。某同學要通過PCR技術獲得被³²p標記且以堿基“C”為末端的、不同長度的子鏈DNA片段。在反應管中已經有單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應的緩沖液等，還需要加入下列哪些原料（　　）
A．①③ B．①④ C．②③ D．②④
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：34引用：2難度：0.7
解析
2．雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結構如圖所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的DNA子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F通過PCR技術獲得被標記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應管中已經有單鏈模板、引物、相關的酶和相應的緩沖液等，還需加入的原料是（　　）

①dCTP，dGTP，dATP
②dGTP，dATP，dTTP，dCTP
③α位被³²P標記的ddTTP
④γ位被³²P標記的ddTTP
A．①③ B．①④ C．②③ D．②④
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：25難度：0.6
解析

3．為了分析模板DNA鏈的核苷酸序列，在4組反應體系中加入放射性標記的引物、單鏈DNA模板、DNA聚合酶、dNTP以及特定的ddNTP（雙脫氧核苷酸），ddNTP可以取代相應的dNTP，終止DNA子鏈的延伸，反應后得到不同長度的DNA片段混合物，再進行凝膠電泳放射自顯影測序，得到如下結果。下列敘述正確的是（　?。?br />

A．構成dNTP的五碳糖是核糖，構成ddNTP的五碳糖是脫氧核糖

B．引物鏈與模板鏈配對后，DNA聚合酶從引物的3′端開始延伸子鏈

C．上述過程的原理是堿基互補配對，不需要加入解旋酶

D．據圖分析模板鏈由5′→3′的堿基序列是-CTGACTTCGACAA

發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：32引用：3難度：0.8

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