手足口病是一種由腸道病毒引起的傳染性疾病。腸道病毒71型(EV71)是其主要病原體之一,因其具有嗜神經(jīng)性,嚴(yán)重者可出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥。目前臨床上沒有針對EV71的特效藥,本實驗旨在通過制備EV71相關(guān)抗血清,為開發(fā)EV71亞單位疫苗(微生物的成分或產(chǎn)物)提供支持。
實驗材料:若干健康小鼠、EV71滅活病毒、EV71外殼蛋白VP1和VP2、非EV71蛋白、生理鹽水、注射器(抗原-抗體結(jié)合強度檢測方法不作要求)。
實驗思路:
Ⅰ.取若干生長狀況相同的健康小鼠,隨機均分為1~4四組;
Ⅱ.
依次將EV71滅活病毒、EV71外殼蛋白VP1、VP2和生理鹽水注射到第1~4組小鼠體內(nèi)
依次將EV71滅活病毒、EV71外殼蛋白VP1、VP2和生理鹽水注射到第1~4組小鼠體內(nèi)
;
Ⅲ.將各組小鼠飼養(yǎng)在適宜環(huán)境下,多次重復(fù)步驟Ⅱ,等量提取各組小鼠的血清,測定血清與等量 EV71滅活病毒
EV71滅活病毒
、VP1
VP1
、VP2
VP2
、非EV71蛋白的結(jié)合強度;
Ⅳ.記錄并分析實驗結(jié)果。
(1)完善實驗思路;
(2)根據(jù)部分實驗結(jié)果繪制柱形圖,如圖所示:
請分析:
①預(yù)測第1、2組與VP1的結(jié)合強度,并在圖中補充柱形圖;
②將EV71滅活病毒注射到小鼠體內(nèi),能激活機體第三道防線中的 體液
體液
免疫,其中淋巴細(xì)胞增殖分化主要發(fā)生在 淋巴結(jié)
淋巴結(jié)
中;實驗過程多次重復(fù)步驟Ⅱ,目的是 二次免疫引發(fā)機體產(chǎn)生更多的抗體和記憶細(xì)胞,提高血清抗體濃度
二次免疫引發(fā)機體產(chǎn)生更多的抗體和記憶細(xì)胞,提高血清抗體濃度
。
③測定第1~3組小鼠血清與非EV71蛋白的結(jié)合強度,目的是 排除抗體與無關(guān)蛋白的結(jié)合對實驗結(jié)果的干擾
排除抗體與無關(guān)蛋白的結(jié)合對實驗結(jié)果的干擾
;
④根據(jù)上述實驗,以 VP1
VP1
成分為目標(biāo)制備EV71亞單位疫苗效果較佳。