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鐮孢菌引起的小麥赤霉病被稱為小麥“游癥”，是威脅糧食安全的重大國際性難題。我國科學家從小麥近緣屬植物長穗偃麥草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（編碼一種谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶），為解決小麥赤霉病的世界性難題提供了“金鑰匙”。研究發(fā)現(xiàn)，用光誘導型啟動子（PrbcS）能夠使Fhb7基因表達，其結(jié)合T基因后能使Fhb7基因更高水平表達。
（1）PrbcS是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)
轉(zhuǎn)錄
轉(zhuǎn)錄
過程。
（2）通過PCR技術(shù)擴增Fhb7基因片段，反應過程一般由95℃熱變性、55～60℃引物和模板配對、72℃延伸三個步驟，經(jīng)過多次循環(huán)完成。延伸階段選用72℃而非95℃綜合考慮了兩個因素，這兩個因素是
防止DNA變性
防止DNA變性
和
保持Taq酶活性所需溫度條件
保持Taq酶活性所需溫度條件
。
（3）圖中甲、乙均為Fhb7基因表達載體構(gòu)建過程中的中間載體，請分析重組載體丙的部分構(gòu)建過程。區(qū)別含有中間載體甲與含有重組載體丙的微生物的方法是
用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)
用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)
。經(jīng)酶切后凝膠電泳，測得含2B基因片段長度為0.3kb,經(jīng)圖示信息分析，含光誘導型啟動子-T基因的片段長度約為
1.8kb
1.8kb
。據(jù)圖分析，形成重組載體丙，需要使用限制酶
HindШ和NotⅠ
HindШ和NotⅠ
切割中間載體甲和乙，圖中重組載體丙問號處有
6
6
種限制酶的酶切位點。
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（注：圖中單詞代表限制酶酶切位點）

【答案】RNA聚合酶；轉(zhuǎn)錄；防止DNA變性；保持Taq酶活性所需溫度條件；用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)；1.8kb；HindШ和NotⅠ；6
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：29引用：2難度：0.6
相似題

  • 1．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
    （1）在進行基因工程操作時，先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是
     
    。
    （2）若要使目的基因在受體細胞中表達，需要構(gòu)建基因表達載體，其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外，還包括
     
    、
     
    、
     
    ，其中
     
    與目的基因的轉(zhuǎn)錄開始有關(guān)。
    （3）當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     
    。
    （4）如何從個體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無抗真菌病的能力？
     
    。
    （5）若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株，但植株抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布：2024/10/31 8:0:1組卷：4引用：1難度：0.7

  • 2．油菜是世界上重要的油料作物，其生長期常受到病蟲害的危害，其中80%是由病原真菌引起。過去對油菜真菌病害的控制主要使用化學殺菌劑；真菌的細胞壁由幾丁質(zhì)組成，現(xiàn)利用外源幾丁質(zhì)酶基因（如圖1）注入油菜（本身無幾丁質(zhì)酶基因）中從而提高油菜的抗真菌能力，該過程利用了限制性核酸內(nèi)切酶（如圖2）。請回答下列問題：
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    （1）據(jù)圖2寫出酶BamHI酶切后形成的DNA片段的末端序列：
     
    。形成重組DNA分子時，含幾丁質(zhì)酶基因的DNA片段可能自身
     
    。
    （2）將重組DNA導入油菜細胞的常用方法是
     
    。為了檢測油菜細胞是否成功導入幾丁質(zhì)酶基因，可利用
     
    制成的探針進行檢測。
    （3）將轉(zhuǎn)基因油菜細胞培養(yǎng)成幼苗，過程中需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中
     
    的配比，幼苗可置于有
     
    的環(huán)境中，檢測幾丁質(zhì)酶基因是否成功表達。
    （4）采用化學殺蟲劑在消滅真菌病害的同時，也污染了
     
    （至少2種）等無機環(huán)境，更為重要的是使得
     
    迅速減少。

    發(fā)布：2024/10/31 8:0:1組卷：3引用：1難度：0.7

  • 3．已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-，根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是（　　）
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    發(fā)布：2024/10/31 13:0:2組卷：46引用：2難度：0.7
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