鐮孢菌引起的小麥赤霉病被稱為小麥“游癥”，是威脅糧食安全的重大國際性難題。我國科學家從小麥近緣屬植物長穗偃麥草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（編碼一種谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶），為解決小麥赤霉病的世界性難題提供了“金鑰匙”。研究發(fā)現(xiàn)，用光誘導型啟動子（PrbcS）能夠使Fhb7基因表達，其結(jié)合T基因后能使Fhb7基因更高水平表達。
（1）PrbcS是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被 RNA聚合酶RNA聚合酶識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù) 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄過程。
（2）通過PCR技術擴增Fhb7基因片段，反應過程一般由95℃熱變性、55～60℃引物和模板配對、72℃延伸三個步驟，經(jīng)過多次循環(huán)完成。延伸階段選用72℃而非95℃綜合考慮了兩個因素，這兩個因素是 防止DNA變性防止DNA變性和 保持Taq酶活性所需溫度條件保持Taq酶活性所需溫度條件。
（3）圖中甲、乙均為Fhb7基因表達載體構(gòu)建過程中的中間載體，請分析重組載體丙的部分構(gòu)建過程。區(qū)別含有中間載體甲與含有重組載體丙的微生物的方法是 用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)。經(jīng)酶切后凝膠電泳，測得含2B基因片段長度為0.3kb,經(jīng)圖示信息分析，含光誘導型啟動子-T基因的片段長度約為 1.8kb1.8kb。據(jù)圖分析，形成重組載體丙，需要使用限制酶 HindШ和NotⅠHindШ和NotⅠ切割中間載體甲和乙，圖中重組載體丙問號處有 66種限制酶的酶切位點。
（注：圖中單詞代表限制酶酶切位點）
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】RNA聚合酶；轉(zhuǎn)錄；防止DNA變性；保持Taq酶活性所需溫度條件；用含有卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)；1.8kb；HindШ和NotⅠ；6
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：29引用：2難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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