水蛭是我國的傳統(tǒng)中藥材,主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一,具有良好的抗凝血作用。擬通過蛋白質工程改造水蛭素結構,提高其抗凝血活性?;卮鹣铝袉栴}:
(1)蛋白質工程流程如圖所示,物質a是
氨基酸序列多肽鏈
氨基酸序列多肽鏈
,物質b是 mRNA
mRNA
。在生產過程中,物質b可能不同,合成的蛋白質空間構象卻相同,原因是 密碼子具有簡并性,使不同mRNA翻譯出來的氨基酸序列相同
密碼子具有簡并性,使不同mRNA翻譯出來的氨基酸序列相同
。
(2)蛋白質工程是基因工程的延伸,基因工程中獲取目的基因的常用方法有 從基因文庫中獲取目的基因
從基因文庫中獲取目的基因
、通過DNA合成儀人工合成
通過DNA合成儀人工合成
和利用 PCR 技術擴增。PCR 技術遵循的基本原理是 DNA半保留復制
DNA半保留復制
。
(3)將提取的水蛭蛋白經甲、乙兩種蛋白酶水解后,分析水解產物中的肽含量及其抗凝血活性,結果如圖所示。推測兩種處理后酶解產物的抗凝血活性差異主要與肽的 種類
種類
(填“種類”或“含量”)有關,導致其活性不同的原因是 對水蛭蛋白進行酶解時的酶的種類不同,導致水蛭蛋白水解產生的多肽的氨基酸排列順序不同,多肽的數目,空間結構不同
對水蛭蛋白進行酶解時的酶的種類不同,導致水蛭蛋白水解產生的多肽的氨基酸排列順序不同,多肽的數目,空間結構不同
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(4)若要比較蛋白質工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產物和天然水蛭素的抗凝血活性差異,簡要寫出實驗設計思路 取3支試管,分別加入等量的蛋白質工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產物和天然水蛭素;取同一種動物(如家兔)血液,將等量的血液加入1、2、3號三支試管中,放在適宜條件下靜置一段時間,觀察統(tǒng)計三支試管中血液凝固情況
取3支試管,分別加入等量的蛋白質工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產物和天然水蛭素;取同一種動物(如家兔)血液,將等量的血液加入1、2、3號三支試管中,放在適宜條件下靜置一段時間,觀察統(tǒng)計三支試管中血液凝固情況
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