據(jù)研究不同濃度的胰島素對減緩肝細(xì)胞損傷有保護(hù)作用,且胰島素濃度越高保護(hù)作用越強(qiáng):LPS是一種導(dǎo)致肝損傷的常見物質(zhì)(用生理鹽水配制)?,F(xiàn)欲以大鼠為材料驗(yàn)證上述結(jié)論,回答下列問題:
(1)材料制備:
①肝細(xì)胞懸液的制備:取某健康幼年大鼠的肝臟,適宜條件下取出剪碎再用胰蛋白胰蛋白酶消化,經(jīng)多次洗滌、離心離心處理得到分散的肝細(xì)胞,加入適宜的細(xì)胞培養(yǎng)液置于卡氏瓶中,在二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行原代原代培養(yǎng),將培養(yǎng)得到的肝細(xì)胞懸液隨機(jī)分為5組,編號為A~E,每組均需再設(shè)多個重復(fù)樣液,置于相同且適宜的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)備用。
②胰島素溶液:用生理鹽水配制低、中、高三種濃度的胰島素溶液,分別加入到C、D、E組的肝細(xì)胞懸液中。
(2)實(shí)驗(yàn)方案及結(jié)果預(yù)期:
①A組作為空白對照組,則往B、C、D、E組還需加入等量的LPSLPS。
②若本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果用細(xì)胞存活率作為檢測指標(biāo),各組的存活細(xì)胞數(shù)先用比色計(jì)比色計(jì)測出OD值,然后計(jì)算各組的細(xì)胞存活率。[各組細(xì)胞存活率=該組OD值A組OD值×100%,不考慮細(xì)胞死亡對OD值的影響。]
③用柱形圖表示各組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(3)實(shí)驗(yàn)分析:從細(xì)胞水平分析推測胰島素對減緩肝細(xì)胞損傷的機(jī)理可能有促進(jìn)細(xì)胞分裂、延緩細(xì)胞凋亡促進(jìn)細(xì)胞分裂、延緩細(xì)胞凋亡(至少寫出二點(diǎn))。
該組
OD
值
A
組
OD
值
【答案】胰蛋白;離心;二氧化碳培養(yǎng)箱;原代;LPS;比色計(jì);促進(jìn)細(xì)胞分裂、延緩細(xì)胞凋亡
【解答】
【點(diǎn)評】
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