在含有X-gal和IPTG物質(zhì)的培養(yǎng)基上，大腸桿菌質(zhì)粒上的lacZ′基因如表達出產(chǎn)物β-半乳糖苷酶，則能使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色．基因工程中常利用該原理從導入質(zhì)粒的受體細胞中篩選出真正導入重組質(zhì)粒的細胞．請據(jù)圖回答：
（1）限制酶EcoRI的識別序列和酶切位點是-G↓，AATTC-，SmaI的識別序列和酶切位點是-CCC↓GGG-，圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相應的末端，連接的末端序列是-TTAA-TTAA．限制酶EcoRI在質(zhì)粒上的酶切位點在lacZ′基因中，故該基因工程中，lacZ′基因的作用為標記標記基因．
（2）獲取目的基因后，常利用PCRPCR技術在體外將其大量擴增，此過程需要一種特殊的酶叫Taq酶（或“耐高溫的DNA聚合酶”）Taq酶（或“耐高溫的DNA聚合酶”）．
（3）轉(zhuǎn)化過程中，大腸桿菌應先用Ca2+（或CaCl2溶液）Ca2+（或CaCl2溶液）處理，使其成為感受態(tài)感受態(tài)細胞．
（4）顏色為白色的是含有目的基因的菌落，原因是lacZ‘標記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達出β-半乳糖苷酶，故菌落為白色lacZ‘標記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達出β-半乳糖苷酶，故菌落為白色．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】-TTAA；標記；PCR；Taq酶（或“耐高溫的DNA聚合酶”）；Ca2+（或CaCl2溶液）；感受態(tài)；lacZ‘標記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達出β-半乳糖苷酶，故菌落為白色
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：24引用：2難度：0.3
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6