實驗小組將啟動子rd29A和擬南芥植株的抗寒基因DREBI相連后導入大豆，獲得了抗寒轉(zhuǎn)基因植株，圖1表示構(gòu)建重組質(zhì)粒時所用的載體，已知Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ為四種不同的限制酶，其各自識別的DNA序列如表所示?；卮鹣铝袉栴}：
| 限制酶 | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ |
| 識別序列及切割位點 | ↓GGATCC CCTAGG↑ |
↓TGTACA ACATGT↑ |
↓GTAC CATG↑ |
↓AAGCTT TTCGAA↑ |
Ⅱ、Ⅳ
Ⅱ、Ⅳ
兩種限制酶切割質(zhì)粒，原因是 同時使用兩種限制酶可產(chǎn)生不同的黏性末端，使目的基因和質(zhì)粒定向連接，酶Ⅰ破壞了標記基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同
同時使用兩種限制酶可產(chǎn)生不同的黏性末端，使目的基因和質(zhì)粒定向連接，酶Ⅰ破壞了標記基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同
。（2）欲將重組質(zhì)粒導入大豆的愈傷組織細胞中，一般使用
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
法導入。培養(yǎng)基中需要加入 四環(huán)素
四環(huán)素
（填“四環(huán)素”或“氨芐青霉素”），其作用是 對含目的基因的組織細胞進行篩選
對含目的基因的組織細胞進行篩選
。（3）實驗小組進一步研究了不同的溫度誘導下轉(zhuǎn)基因植株中抗寒基因DREBI的表達情況，實驗結(jié)果如圖2所示，從分子水平上檢測轉(zhuǎn)基因大豆中DREBI基因的表達產(chǎn)物，可采用的方法是
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
。試根據(jù)檢測結(jié)果闡述目的植株導入DREBI基因的優(yōu)點在于 隨著溫度的降低，DREBI基因的表達產(chǎn)物有利于植物抵抗寒冷脅迫，另外常溫下基因不表達，避免了細胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費
隨著溫度的降低，DREBI基因的表達產(chǎn)物有利于植物抵抗寒冷脅迫，另外常溫下基因不表達，避免了細胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Ⅱ、Ⅳ；同時使用兩種限制酶可產(chǎn)生不同的黏性末端，使目的基因和質(zhì)粒定向連接，酶Ⅰ破壞了標記基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化；四環(huán)素；對含目的基因的組織細胞進行篩選；抗原-抗體雜交；隨著溫度的降低，DREBI基因的表達產(chǎn)物有利于植物抵抗寒冷脅迫，另外常溫下基因不表達，避免了細胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/8/23 6:0:3組卷：13引用：2難度：0.6
相似題
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1．科研人員利用大腸桿菌構(gòu)建了抗蟲基因文庫。最新研究發(fā)現(xiàn)漏斗蜘蛛中的AH基因控制合成的毒素肽具有顯著的殺蟲效果，現(xiàn)以p-B質(zhì)粒為載體，構(gòu)建 AH基因的cDNA文庫。圖1表示p-B質(zhì)粒，其中Cm/表示氯霉素抗性基因，cdB 基因表達產(chǎn)物能抑制大腸桿菌 DNA 復制。圖中箭頭表示相關限制酶的酶切位點，且不同種限制酶識別序列不同，其中AiuI、XbaI、SspI和MfeⅠ識別的堿基序列和酶切位點分別是 AG'CT、T'CTAGA、AAT'ATT、C'AATTG。請分析并回答下列問題：
（1）為獲得AH基因的cDNA，先要從漏斗蜘蛛毒素肽分泌細胞中提取，再通過合成出AH基因的cDNA。若從漏斗蜘蛛其他組織細胞提取，則難以成功，原因是。
（2）若已知AH基因的cDNA兩端部分序列為：5'-AACTATGCGC……CGTAGCCTCT-3'，請寫出PCR擴增該cDNA時的兩個引物對應的局部序列（前10個堿基序列），并標明5'和3'端：，。一個初始雙鏈cDNA經(jīng)四輪循環(huán)后，共消耗這兩種引物的數(shù)量為個。
（3）利用圖中的質(zhì)粒和AH基因構(gòu)建重組質(zhì)粒時，宜選用限制酶雙酶切質(zhì)粒，再選用限制酶切割目的基因，將切割后獲得的DNA片段混合，經(jīng)DNA連接酶處理后，再與大腸桿菌混合培養(yǎng)，在含有適量氯霉素的培養(yǎng)基中添加適量冷的，以促進轉(zhuǎn)化。
（4）經(jīng)上述處理培養(yǎng)后，其中能繁殖的大腸桿菌中應含有的質(zhì)粒是，原因是。發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：8引用：1難度：0.6 -
2．基因工程技術又稱為DNA重組技術，回答相關問題：
（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即和從中分離．
（2）利用某植物的成熟葉片為材料，同時構(gòu)建cDNA文庫和基因組文庫，兩個文庫相比，cDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少，其原因是．
（3）在基因表達載體中，啟動子是聚合酶識別并結(jié)合的部位．若采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞，最常用的原核生物是．
（4）將目的基因?qū)胫参锛毎麜r，采用最多的方法是法．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：2引用：1難度：0.3 -
3．基因治療是指將外源正?；?qū)氚屑毎约m正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達到治療的目的．干擾素基因缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟淋巴細胞，科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失的小鼠進行了基因治療．請回答：
（1）為使干擾素基因在小鼠細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達載體的和之間．
（2）將干擾素基因?qū)隕S細胞的方法是，采用可以鑒定目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA分子上，再將能正常表達干擾素的細胞轉(zhuǎn)入到小鼠體內(nèi)，這種治療方法稱為．導入ES細胞而不是導入上皮細胞是因為ES細胞在功能上具有．
（3）干擾素基因缺失的小鼠易患某種細菌導致的肺炎，引起這種現(xiàn)象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴細胞，降低了小鼠免疫系統(tǒng)的功能．
（4）用于基因治療的基因有三類，一類是把正?；?qū)胗谢蛉毕莸募毎?，以表達出正常性狀來治療，第二類是反義基因，即通過產(chǎn)生的mRNA分子與病變基因產(chǎn)生的進行互補結(jié)合，來阻斷非正常蛋白質(zhì)的合成；第三類是編碼可以殺死癌細胞的蛋白酶基因．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：24引用：2難度：0.5
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