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腫瘤已成為嚴(yán)重危害人類健康的高發(fā)病,主要的治療手段有化療、放療和手術(shù)等,而腫瘤細(xì)胞對腫瘤藥物產(chǎn)生耐藥性是化療失敗的主要原因之一,研究表明腫瘤細(xì)胞耐藥性的產(chǎn)生與過量表達(dá)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白BCRP有關(guān),研究人員嘗試建立穩(wěn)定表達(dá)BCRP的細(xì)胞系?;卮鹣铝袉栴}:
(1)研究人員從人的
癌細(xì)胞
癌細(xì)胞
(填“普通體細(xì)胞”或“癌細(xì)胞”)中提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得大量BCRP基因。
(2)隨后構(gòu)建BCRP基因的真核表達(dá)載體,研究人員選擇了P質(zhì)粒作為載體,因?yàn)槠渚哂校耗鼙徽婧思?xì)胞識別的啟動子,其作用是
RNA聚合酶識別和結(jié)合位點(diǎn)
RNA聚合酶識別和結(jié)合位點(diǎn)
;抗新霉素基因的作用是
便于將含目的基因的細(xì)胞篩選出來
便于將含目的基因的細(xì)胞篩選出來
。
(3)通常用兩種酶切割P質(zhì)粒和BCRP基因的原因是
避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接
避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接
,將表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是
顯微注射法
顯微注射法
,該過程的變異類型是
基因重組
基因重組
。
(4)通過篩選獲得抗新霉素的受體細(xì)胞,并對其進(jìn)行多次檢測,最終獲得能高效表達(dá)BCRP的細(xì)胞,在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后分瓶進(jìn)行
傳代
傳代
(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng),最終獲得穩(wěn)定的細(xì)胞系,推測此細(xì)胞系在后續(xù)研究中的用途有
研究能阻止BCRP過量表達(dá)的藥物
研究能阻止BCRP過量表達(dá)的藥物
(寫出1點(diǎn))。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】癌細(xì)胞;RNA聚合酶識別和結(jié)合位點(diǎn);便于將含目的基因的細(xì)胞篩選出來;避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接;顯微注射法;基因重組;傳代;研究能阻止BCRP過量表達(dá)的藥物
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/13 8:0:9組卷:1引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體,并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中,進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)。回答下列問題:
    (1)研究人員利用PCR技術(shù)特異性地?cái)U(kuò)增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     

    (2)獲取目的基因后,為了構(gòu)建基因表達(dá)載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    (答出3種)等結(jié)構(gòu)。
    (3)研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測,相關(guān)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明
     
    。
    組別 實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    轉(zhuǎn)基因鹽藻(A組) 離心收集三組細(xì)
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品
    將TI注射到大白
    兔體內(nèi),獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進(jìn)行混合檢測
    有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻(B組) 無雜交帶
    陽性對照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5引用:4難度:0.7
  • 2.我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,下列說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/3 12:0:2組卷:3引用:1難度:0.7
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