胰島素是機體內(nèi)唯一降低血糖的激素,用于治療糖尿病。生產(chǎn)胰島素可用“胰島素A、B鏈分別表達法”,如圖1是構(gòu)建的基因表達載體,圖2表示利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程示意圖(融合蛋白A、B分別表示β半乳糖苷酶與胰島素A、B鏈融合的蛋白)。請回答下列問題:
(1)與圖1中氨芐青霉素抗性基因相比,人體內(nèi)的胰島素基因特有的結(jié)構(gòu)是內(nèi)含子內(nèi)含子。圖中的β-半乳糖苷酶編碼區(qū)含有含有(填“含有”或“不含有”)編碼起始密碼的序列。
(2)為了將β半乳糖苷酶編碼區(qū)和胰島素A或B鏈編碼區(qū)序列等插入質(zhì)粒載體中,作為運載體必須具備的條件之一是具有多個限制酶切割位點具有多個限制酶切割位點。
(3)圖2中應(yīng)選用對氨芐青霉素敏感敏感(填“敏感”或“不敏感”)的大腸桿菌作為受體菌,轉(zhuǎn)化前通常用Ca2+處理,使其處于一種容易吸收外源DNA容易吸收外源DNA的感受態(tài)細胞。
(4)融合蛋白A或B中的β半乳糖苷酶可使胰島素A或B鏈上的蛋白酶切割位點隱藏在內(nèi)部,可能的作用是防止胰島素A鏈或B鏈被大腸桿菌內(nèi)的蛋白酶分解防止胰島素A鏈或B鏈被大腸桿菌內(nèi)的蛋白酶分解。
(5)將純化的胰島素A鏈和B鏈以二硫二硫鍵連接成雙鏈,要使其具有降低血糖的功能,還需繼續(xù)加工形成一定的空間結(jié)構(gòu)空間結(jié)構(gòu)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】內(nèi)含子;含有;具有多個限制酶切割位點;敏感;容易吸收外源DNA;防止胰島素A鏈或B鏈被大腸桿菌內(nèi)的蛋白酶分解;二硫;空間結(jié)構(gòu)
【解答】
【點評】
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