木質(zhì)纖維素是地球上最為豐富的可再生資源，中國科學(xué)家利用基因工程的方法構(gòu)建了一株嗜熱厭氧桿菌H，以花生殼、玉米芯等為原料發(fā)酵生產(chǎn)生物燃料乙醇，以期提高農(nóng)業(yè)廢棄物的整體利用價值。據(jù)此回答下列問題：
（1）研究者將取樣器放入溫泉底部取樣，將樣本加入到含有

無菌水

無菌水

的錐形瓶中稀釋，利用厭氧技術(shù)將稀釋液接種到以纖維素為

唯一碳源

唯一碳源

的培養(yǎng)基中初步獲得能降解纖維素的嗜熱厭氧桿菌。培養(yǎng)過程所用的玻璃器皿需用

干熱滅菌（濕熱滅菌、高壓蒸汽滅菌）

干熱滅菌（濕熱滅菌、高壓蒸汽滅菌）

（填方法）滅菌。
（2）基于嗜熱厭氧桿菌的特殊代謝能力（圖a），研究人員構(gòu)建了雙功能醇醛脫氫酶基因（Adh）的過量表達(dá)載體，圖b為構(gòu)建表達(dá)載體時所需的關(guān)鍵條件。

①為保證雙功能醇醛脫氫酶基因（Adh）能通過雙酶切以正確方向插入質(zhì)粒，需設(shè)計引物1和引物2，其中引物1的序列為5’

GGTACCGTACCTTTGT

GGTACCGTACCTTTGT

3’。
②將重組表達(dá)載體導(dǎo)入嗜熱厭氧桿菌，然后置于含有

紅霉素

紅霉素

的選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選，經(jīng)鑒定及擴大培養(yǎng)得到工程菌。
（3）將構(gòu)建的工程菌進(jìn)行搖瓶發(fā)酵，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙醇產(chǎn)量提高，副產(chǎn)物乙酸產(chǎn)量下降。結(jié)合其代謝途徑，分析出現(xiàn)這種結(jié)果的原因

Adb基因過量表達(dá)的Adh酶增多，與P酶競爭結(jié)合乙酰輔酶A

Adb基因過量表達(dá)的Adh酶增多，與P酶競爭結(jié)合乙酰輔酶A

。
（4）嗜熱厭氧桿菌最適生長溫度為55-75℃，產(chǎn)物乙醇在溫度超過50℃即可快速蒸餾出。相對于傳統(tǒng)的發(fā)酵菌株，利用嗜熱厭氧桿菌發(fā)酵產(chǎn)乙醇主要有優(yōu)勢

①高溫發(fā)酵可殺滅雜菌或抑制雜菌的生長，從而減少發(fā)酵污染；②高溫能夠促進(jìn)乙醇的回收，有利于連續(xù)蒸餾；③嗜熱厭氧菌在大規(guī)模培養(yǎng)時不需要供氧；④高溫環(huán)境下微生物代謝活性及產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率較高

①高溫發(fā)酵可殺滅雜菌或抑制雜菌的生長，從而減少發(fā)酵污染；②高溫能夠促進(jìn)乙醇的回收，有利于連續(xù)蒸餾；③嗜熱厭氧菌在大規(guī)模培養(yǎng)時不需要供氧；④高溫環(huán)境下微生物代謝活性及產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率較高

（寫出兩點即可）。