豬血紅蛋白位于豬紅細(xì)胞內(nèi)，含有4條肽鏈。以下是分離及提取豬血紅蛋白的過程，回答下列問題：
（1）在新鮮的豬血中加入按125：1配成的0.85%NaCl溶液（生理鹽水）和40%檸檬酸鈉，混合液，此混合液的作用是

維持紅細(xì)胞的形態(tài)，防止血液凝固

維持紅細(xì)胞的形態(tài)，防止血液凝固

。然后離心，棄去血清。再用生理鹽水洗滌三次，用以除去雜蛋白。
（2）向盛有洗滌好的豬紅細(xì)胞的燒杯中加入蒸餾水可釋放血紅蛋白，原理是

紅細(xì)胞在蒸餾水中吸水漲破，釋放血紅蛋白

紅細(xì)胞在蒸餾水中吸水漲破，釋放血紅蛋白

。加入飽和（NH₄）₂SO₄溶液后，發(fā)現(xiàn)有紅色沉淀析出，這個過程稱為

鹽析

鹽析

。經(jīng)過濾可得到豬血紅蛋白的粗蛋白。
（3）將豬血紅蛋白的粗蛋白溶解在磷酸緩沖液中，用凝膠色譜柱層析純化。磷酸緩沖液的作用是

有利于維持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能

有利于維持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能

凝膠色譜法分離豬血紅蛋白的原理是分子量較大蛋白質(zhì)通過凝膠顆粒的間隙，路程較短，移動速度較快，先洗脫出來；

分子量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，路程較長，移動速度較慢，后洗脫出來

分子量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道，路程較長，移動速度較慢，后洗脫出來

。
（4 ）將凝膠色譜柱層析純化得到的豬血紅蛋白用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行分離。SDS有強(qiáng)電荷，能覆蓋蛋白質(zhì)上的電荷，并使豬血紅蛋白解聚為4條肽鏈。因此，電泳時蛋白質(zhì)的遷移率完全取于分子

分子量

分子量

。如圖是電泳結(jié)果，結(jié)果表明分離得到的豬血紅蛋白純度較高，判斷依據(jù)是

電泳后只有一個條帶

電泳后只有一個條帶

，豬血紅蛋白的分子量約為

64KDa

64KDa

。