黃曲霉毒素主要是由黃曲霉和寄生曲霉等多種真菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，包括AFB1、AFB2、AFG1等多種衍生物。黃曲霉毒素的毒性強，具有抑制免疫、誘導(dǎo)突變和致癌的作用，香豆素是黃曲霉毒素的結(jié)構(gòu)類似物。黃曲霉毒素的生物去除法是利用微生物分泌的酶降解黃曲霉毒素，產(chǎn)生低毒或無毒的降解產(chǎn)物。研究人員為篩選高效降解黃曲霉毒素的菌株，開展了相關(guān)的研究?；卮鹣铝袉栴}：
（1）配制的富集培養(yǎng)基和初篩平板培養(yǎng)基，常用 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。富集培養(yǎng)基的成分：香豆素0.1%、（NH4）2SO40.5%、NaCl0.85%、pH7.0；初篩平板培養(yǎng)基的成分：香豆素0.1%、（NH4）2SO40.5%、KH2PO40.25%、MgSO40.1%、Na2HPO4?12H2O 0.05%、CaCl2 0.01%、瓊脂2%、pH6.5。香豆素可用于篩選目的菌的原因是 香豆素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與黃曲霉毒素的類似，作為唯一碳源可使目的菌能夠生長而其他微生物生長受到抑制香豆素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與黃曲霉毒素的類似，作為唯一碳源可使目的菌能夠生長而其他微生物生長受到抑制。初篩平板培養(yǎng)基中無機物的主要作用是 提供無機鹽和維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定提供無機鹽和維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定。
（2）從霉?fàn)€的花生殼、動物糞便中取樣，稀釋后將菌懸液加入到富集培養(yǎng)基中，適宜條件下富集培養(yǎng)三次。將富集培養(yǎng)的菌液用 平板劃線法或稀釋涂布平板平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到初篩平板培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)后，挑選 單個菌落直徑較大單個菌落直徑較大的菌體進行純化培養(yǎng)。
（3）經(jīng)多輪篩選后獲得H菌株。搖瓶培養(yǎng)H菌株一段時間后取5mL發(fā)酵液進行離心，取950μL離心上清液加入5μL一定濃度的AFB1液，控制AFB，的終濃度1μg/mL。反應(yīng)24h后經(jīng)萃取、溶解、過濾后檢測殘余AFB1的含量。該實驗還需要在 滅菌的發(fā)酵離心上清液滅菌的發(fā)酵離心上清液中加入等量的AFB1液作為空白對照。該步驟用于檢測 H菌株分泌的黃曲霉毒素降解酶的活力H菌株分泌的黃曲霉毒素降解酶的活力。
【答案】高壓蒸汽滅菌；香豆素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與黃曲霉毒素的類似，作為唯一碳源可使目的菌能夠生長而其他微生物生長受到抑制；提供無機鹽和維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定；平板劃線法或稀釋涂布平板；單個菌落直徑較大；滅菌的發(fā)酵離心上清液；H菌株分泌的黃曲霉毒素降解酶的活力
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：13引用：2難度：0.7
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⑤啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，酒精的產(chǎn)生積累主要在后發(fā)酵階段完成
⑥可用誘變育種或基因工程等方法選育出性狀優(yōu)良的菌種并進行擴大培養(yǎng)
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