GFP是水母體內(nèi)存在的能發(fā)綠色熒光的一種蛋白??蒲腥藛T以GFP基因為材料,利用基因工程技術獲得了能發(fā)其他顏色熒光的蛋白,豐富了熒光蛋白的顏色種類。
(1)構建目的基因表達載體??蒲腥藛T從構建的GFP突變基因文庫中提取目的基因(均為突變基因)構建表達載體,其模式圖如圖所示(箭頭為GFP突變基因的轉錄方向)。圖中①為 終止子終止子,②為 啟動子啟動子,其作用是 RNA聚合酶識別和結合的部位,驅動基因轉錄RNA聚合酶識別和結合的部位,驅動基因轉錄;圖中氨芐青霉素抗性基因是一種標記基因,其作用是 鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。
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(2)目的基因的表達。科研人員將構建好的表達載體導入大腸桿菌中進行表達,發(fā)現(xiàn)大腸桿菌有的發(fā)綠色熒光,有的發(fā)黃色熒光,有的不發(fā)熒光。請從密碼子特點的角度分析,發(fā)綠色熒光的可能原因是 密碼子具有簡并性密碼子具有簡并性(答出1點即可)。
(3)新蛋白與突變基因的關聯(lián)性分析。將上述發(fā)黃色熒光的大腸桿菌分離純化后,對其所含的GFP突變基因進行測序,發(fā)現(xiàn)其堿基序列與GFP基因的不同,將該GFP突變基因命名為YFP基因(黃色熒光蛋白基因)。若要通過基因工程的方法探究YFP基因能否在真核細胞中表達,實驗思路是 將構建好的表達載體(含有目的基因YFP基因)導入酵母菌中進行表達將構建好的表達載體(含有目的基因YFP基因)導入酵母菌中進行表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】終止子;啟動子;RNA聚合酶識別和結合的部位,驅動基因轉錄;鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來;密碼子具有簡并性;將構建好的表達載體(含有目的基因YFP基因)導入酵母菌中進行表達
【解答】
【點評】
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